U937细胞染色体动粒变异的研究

柳光芬

(重庆消防总队医院检验科 400060)

动粒(kinetochore)又称着丝粒点(centromeric dots，Cd),是细胞分裂前/中期维系姐妹染色单体的重要结构。动粒主要是由多种着丝粒蛋白(centromeric proteins，CENPs)和串联重复的卫星DNA等组成，其内层附着在着丝粒上，外层和纺锤丝微管相连，并在其牵引下完成染色体移动和分离等过程。动粒结构或者组成的缺失或者变化，可能会导致纺锤丝微管的附着失败或者不平衡，进而引起染色体分离异常。有研究发现，在各种类型的肿瘤中染色体数目和形态异常是其显著的遗传学特征，而染色体不分离或错误分离是产生上述结果的直接原因。有研究发现，在HEP-2和SW626等细胞染色体上动粒变异的概率远高于正常细胞[1-2]，而在健康人外周血淋巴细胞动粒的变异则极为罕见[3]。上述发现提示动粒的畸变可能是引起肿瘤细胞染色体异常的原因之一。作者采用改良的动粒-核仁组织区(centromeric dots-nucleolus organizer region，Cd-NOR)银染法[4-5]，分析了U937白血病细胞系的动粒变异情况，以期为急性髓系白血病的诊断提供新手段和后续研究的开展奠定基础。

1 材料与方法

1.1材料 U937白血病细胞株(观察组)保存于重庆消防总队医院检验科，健康人外周血(对照组)也收集于本科室，提前排除遗传病和其他可能引起染色体变异的疾病，所有受试者匀签知情同意书。RPMI1640、胎牛血清(FCS)购自美国Gibco公司，硝酸银等常用试剂匀使用国产分析纯。

1.2方法 U937细胞株使用90% RPMI1640+10% FCS混合培养基在37 ℃，5% CO2浓度，饱和湿度培养，待其生长分裂旺盛时，加入终浓度0.2 μg/mL的秋水仙素，于培养环境中孵育4 h后，0.2%胰蛋白酶消化收获细胞。……