检测CEA mRNA、CK19 mRNA和端粒酶监测肺癌血液转移的应用价值*

李晓慧，张淑荣，薛承岩△，杜新生，杨林瀛，张永强

(1.承德医学院附属医院，河北承德 067000;2.隆化县医院)

肺癌是常见恶性肿瘤之一，转移是肺癌的恶性标志和主要特征之一，也是导致治疗失败和患者死亡的主要原因。及时发现和治疗肺癌转移是改善患者预后的有效途径。至今，对肿瘤转移(尤其是早期转移、血行转移等)的诊断仍无令人满意的方法。本研究提示，检测癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白19(CK19)mRNA和端粒酶对判定肺癌血液转移有较大帮助，报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 103例肺癌患者(肺癌组），男57例、女46例，年龄34-77岁;其中，腺癌24例、鳞癌24例、腺鳞癌19例、大细胞肺癌18例、小细胞肺癌18例，Ⅰ期18例、Ⅱ期19例、Ⅲ期34例、Ⅳ期32例。同期非癌性肺部疾病患者(非肿瘤组)57例，男31例、女26例，年龄33-78岁，包括肺间质肺炎11例、支气管扩张11例、肺结核12例、肺囊肿12例、炎性假瘤11例。所有患者均为我院确诊病例，均经组织病理学检查确诊。另选择36例健康志愿者(健康组)作为对照，男20例、女16例，年龄33-78岁。

1.2 标本采集 用含柠檬酸钠抗凝剂的真空管采集静脉血，充分混匀，4℃离心分离提取有核细胞，用预冷的无RNA酶生理盐水充分洗涤有核细胞，-70℃密封保存，用于检测CEA mRNA、CK19 mRNA和端粒酶。

1.3 检测方法 ①应用逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-NP-PCR）检测CEA mRNA和CK19 mRNA，引物参照文献[1-2]由上海细胞生物研究所合成，逆转录试剂盒和核酸标准物(Marker)为德国Promega公司产品，出现188bp(CEA mRNA)和460bp(CK19 mRNA)核酸电泳带为阳性结果。②应用端粒重复序列扩增-杂交-酶联免疫分析技术(TRAP-Hyb-ELISA）检测端粒酶活性，试剂盒购自华美生物工程公司，检测孔OD值/阴性对照孔OD值＞2.1为端粒酶阳性结果。……