螺内酯对清蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响*

危志强,秦晓华,徐承云,邹宏昌,徐高四,占锦峰,涂卫平

(南昌大学第二附属医院肾内科 330006)

螺内酯对清蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响*

危志强,秦晓华,徐承云,邹宏昌,徐高四,占锦峰,涂卫平△

(南昌大学第二附属医院肾内科 330006)

目的探讨螺内酯对人清蛋白诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生转分化的影响,以及该过程是否通过转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路发挥作用｡方法 体外培养HK-2细胞,将其随机分为7组:A组(未加刺激物)､B组(加入10-7mol/L螺内酯)､C组(加入5mg/mL清蛋白)､D组(加入5mg/mL清蛋白及10-8mol/L螺内酯)､E组(加入5mg/mL清蛋白及10-7mol/L螺内酯)､F组(加入5mg/mL清蛋白及10-6mol/L螺内酯)､G组(先加10μmol/L TGF-β1拮抗剂,30min后加入5mg/mL清蛋白)｡采用RT-PCR检测TGF-β1和整合素连接激酶(ILK)的mRNA表达;细胞免疫荧光检测上皮钙黏素(E-cadherin)､α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA 法检测纤维连接蛋白(FN)的蛋白水平｡结果C组ILK mRNA,α-SMA､FN蛋白较其他各组表达明显增高(P0.05),E-cadherin蛋白表达明显下降(P0.05),而TGF-β1mRNA表达高于除 G组以外其余各组(P0.05)｡与 G组相比,C组 TGF-β1mRNA表达差异无统计学意义(P0.05),而ILK mRNA,α-SMA､FN蛋白表达明显下降(P0.05),E-cadherin表达明显升高(P0.05)｡D､E､F组TGF-β1､ILKmRNA､α-SMA,FN蛋白表达逐渐下降,组间两两比较差异有统计学意义(P0.05);E-cadherin的表达逐渐增高(P0.05)｡结论一定浓度的清蛋白可以诱导体外培养的HK-2细胞发生转分化;螺内酯可抑制人清蛋白诱导HK-2细胞转分化作用,且呈剂量依赖性;TGF-β1/Smads信号通路可能是此过程中的重要通路｡

螺内酯;肾小管;上皮细胞;细胞分化;转化生长因子β

肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)进展为终末期肾衰竭的共同病理途经｡肾小管上皮细胞(HK-2)转分化可……