孕中期羊水干细胞的生物学特性的研究

常 颖，高 垚，李 欢，王欢欢，刘松岩＊

（1.吉林大学中日联谊医院 神经内一科，吉林 长春 130033；2.长春市中心医院 神经内科，吉林 长春 130051）

近20年来，生命科学领域对干细胞的研究一直没有中断。胚胎干细胞由于既受伦理道德宗教的影响；又有导致畸胎瘤发生的风险，因此其研究遇到阻力［1］。神经干细胞的缺陷一是组织来源受限；二是中枢神经系统的微环境决定着移植细胞的分化方向［2］，因此其基础及临床研究也受到限制。骨髓间充质干细胞（MSCs）取材容易，能迅速培养、增殖，便于自体移植，且遗传背景相对稳定，体内植入反应较弱，弥补了胚胎干细胞、神经干细胞的缺点［3］，但成人骨髓源MSC的数量及其增殖分化潜能，会随着人的年龄增加而下降，且病毒感染率较高。由于采集骨髓MSC须对供者行骨髓穿刺术，因此其来源受到一定限制，难以产业化。因此羊水干细胞（amniotic fluid－derived stem cells，AFCs）做为一种新的干细胞来源，成为国内外研究的热点。本研究从人孕中期羊水（h AFC）中分离、提纯、扩增羊水干细胞，并分析其生物学特性。

1 材料与方法

1.1 主要器材与试剂 Amnio MAX－Ⅱ培养基，α－MEM（Gibco公司）；胎牛血清、HEPES缓冲液（Hyclone公司）；胰蛋白酶（Sigma公司）；荧光素标记小鼠抗人CD44、CD45抗体；倒置相差显微镜（O－lympus）；YJ－2操净台（苏州净化设备厂），CO2孵箱（SANYO日本）

1.2 h AFC的原代培养 10例羊水标本来自怀孕16－22周行产前检查或自愿引产的孕妇，在超声引导下行羊膜腔穿刺取得20 ml羊水。取标本前均征得孕妇本人同意，并得到医院伦理委员会批准。羊水标本在室温下1 000／min离心5 min，弃上清，加入Amnio MAX－Ⅱ培养基，置……