四磨汤对胃肠道Cajal间质细胞的体外增殖干预作用

王颖航，郭淑婷，牛锦铭，刘宏岩

(1.长春中医药大学附属医院,吉林 长春,130021；2.长春中医药大学,吉林 长春 130117)

四磨汤又名四磨饮，《济生方》卷二记载由人参、槟榔、沉香、天台乌药组成，能破滞降逆，补气扶正，治七情伤感、上气喘息、妨闷不食，诸药合用，可奏顺气降逆，消积止痛之功。文献报道[1-2]显示，四磨汤作为促胃肠动力中药得到广泛使用，临床上的应用已涉及到内、外、妇、儿等各科，且取得了较好的疗效。四磨汤对于胃肠动力障碍性疾病有明显调节胃肠运动的作用。有研究[3-4]证实ICC是胃肠道的起搏细胞,可产生自发电节律变化，沿胃肠道传递形成慢波。并且还具有传导慢波，介导肠神经信号传导等重要功能。胃肠动力障碍性疾病的发生与ICC密切相关，特别是肠道ICC细胞数量的减少或网状结构的破坏[5-7]。Gibbons等[8]证实在人类正常结肠道组织内,ICC的凋亡是一个持续动态的过程，ICC凋亡的程度反映了ICC细胞网络的更新能力。因此,延缓ICC的凋亡,维持完整的ICC细胞网络对于预防和治疗胃肠道动力障碍性疾病有重要意义。本实验初步探讨了四磨汤对ICC体外增殖的干预作用,为四磨汤对胃肠动力障碍性疾病的临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 动物 SD大鼠，昆明种小鼠(出生后15 d),雌雄不拘。由吉林大学实验动物中心提供。

1.1.2 试剂 M199培养基(Gibco),SCF(Sigma)，Ⅱ型胶原酶(Gibco)，胎牛血清，MTT(Sigma)，DMSO(Sigma)，Ficoll400(Sigma)。

1.2 方法

1.2.1 小肠组织单细胞悬液的制备 小鼠禁食12 h后，无菌条件下取距离回盲部10 cm的小肠，放入培养皿，剥离系膜与血管，用PBS(pH 7.0)将小肠内容物冲洗干净，将小肠用注射器针头纵行剖开，剥离黏膜层，PBS反复冲洗肌条3～4次，将肌条剪碎至1～2 mm3小块后放入烧杯中，加入 Ⅱ 型胶原酶(1.3 mg/mL)，37 ℃消化30 min。……