谷芽不同炮制品中α-淀粉酶激活剂的含量比较＊

徐 鹏，许 娟，朱丽婷 ，魏仁荣，贺福元，石继连

谷芽为禾本科植物稻 Oryza sativa L.的成熟果实经发芽干燥而得。2010年版《中国药典(一部)》收载了生谷芽、炒谷芽及焦谷芽等常用的3种炮制品，生谷芽具有和中消食、健脾开胃的功效，用于食积不消、腹胀口臭、脾胃虚弱、不饥食少;炒谷芽偏于消食，用于不饥食少;焦谷芽善化积滞，用于积滞不消[1]。目前，关于谷芽炮制品α-淀粉酶激活剂(硝酸根离子和氯离子)的研究尚未见国内外有关文献报道。为此，本研究中分别用紫外分光光度法测定硝酸根离子，用滴定法测定氯离子，发现谷芽3种炮制品中含有不同含量的α-淀粉酶激活剂。本法操作简便精确、快速经济，为谷芽炮制机理的进一步研究提供试验依据。

1 仪器与试药

TU-1900型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);AR1140型分析天平(上海力衡仪器仪表有限公司);CLJBQ-1型电热套(西安中诺尔仪器有限公司);2XZ-1型真空泵(上海比朗仪器有限公司);800型调速电动离心机(金坛市岸头良友实验仪器厂);DS-3510DT型超声波清洗器(上海生析超声仪器有限公司)。稻谷购于长沙市望城区黄金乡，经湖南中医药大学药学院杨梓懿教授鉴定为禾本科植物稻 Oryza sativa L.的成熟新鲜干燥果实;试剂均为分析纯，水为自制蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 不同炮制品的制备[2]

生谷芽:取成熟而饱满的稻，用清水浸泡至六七成透，捞出，置能排水的容器内，覆盖，每日淋水1～2次，保持湿润，待须根长至1 cm时，取出晒干，除去杂质。

炒谷芽:取净生谷芽置炒制容器内，用文火加热，炒至表面深黄色，大部分暴裂，并有香气逸出时，取出晾凉，筛去灰屑。

焦谷芽:取净生谷芽置炒制容器内，用中火加热，炒至表面焦黄色，大部分暴裂，并有焦香气逸出时，取出晾凉，筛去灰屑。

2.2 硝酸根离子的测定[3]

2.2.1 溶液制备

精密称取在105℃烘干1 h的硝酸钾0.163 1 g，加水溶解定容至1 000 mL，作为贮备溶液。取贮备溶液10.0 mL，置100 mL量瓶中，用水定容至刻度，即得含硝酸根0.010 mg/mL的对照品溶液。分别精密称取2.1项下方法制备的炮制品粗粉(过二号筛)各5 g，置具塞锥形瓶中，精密加水100 mL，水浴提取15 min，冷却，补重，离心，取上清液作为供试品溶液。

2.2.2 样品分析

精密吸取供试品溶液50 mL，加入100 mL的量瓶中，加入盐酸溶液1 mL，摇匀。加入5 mL氨基磺酸铵溶液，加水稀释至刻度，摇匀。于分光光度计上210 nm波长处测定吸光度。

2.2.3 方法学考察

空白试验:取50 mL水，置100 mL的量瓶中，按2.2.2项下方法进行测定。结果显示空白对照无干扰。

标准曲线绘制:分别精密吸取对照品溶液 1，5，10，20，30，40，50 mL，分别置100 mL量瓶中，按2.2.2项下方法操作，测定吸光度，以吸光度为纵坐标、硝酸根质量浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=0.084 4X+0.356 4，r=0.999 1(n=7)。结果，表明，硝酸根质量浓度在0.1～5.0μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。

精密度试验:取同一供试品溶液，连续测定6次，计算其吸光度的 RSD为0.09%，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取2 mL供试品溶液，分别于配制后0，1，2，4，8，12，24 h时依法测定其吸光度。结果的 RSD为1.09%(n=7)，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

重复性试验:取同一批炮制品6份，按2.2.1项下方法制备供试品溶液后，按2.2.2项下方法测定吸光度，其 RSD为0.72%，说明方法有较好的重复性。

加样回收试验:精密称取已知含量的炮制品6份，各0.1 g，分别精密加入高、中和低剂量的对照品各2份，按2.2.1项下方法制备供试品溶液后，按2.2.2项下方法测定其吸光度，计算平均回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果(n=6)

2.2.4 样品含量测定

精密称取3种炮制品各3份，按2.2.1项下方法制备供试品溶液后，按2.2.2项下方法测定其吸光度，计算硝酸根的含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=3)

2.3 氯离子的测定

2.3.1 溶液制备

取17 g硝酸银，精密称定，加水溶解后，置1 000 mL量瓶中加水稀释至刻度，即得0.1 mol/L的硝酸银滴定液。取1.65 g硝酸银，精密称定，经270～300℃烘干的基准氯化钠，置1 000 mL量瓶中，加水定容至刻度，混匀，贮存在塑料瓶中，得氯离子标准溶液。

2.3.2 硫氰酸铵标准溶液的制备与标定

称取7.6 g硫氰酸铵置1 L量瓶中，加水定容至刻度。精密吸取5 mL氯离子标准溶液，置150 mL烧杯中，加入5 mL硝酸，用微量滴定管加入硝酸银滴定液8 mL，加热，微沸至沉淀凝聚，稍冷，加2 mL高铁铵钒指示剂，用硫氰酸铵标准溶液滴定过量的硝酸银，至出现粉红色为止。同时进行空白试验。硫氰酸铵标准溶液的实际质量浓度 C(mol/L)=m/[0.035 45×(V0-V)]，式中 m为所取氯离子标准溶液中氯离子的质量(g)，V0为空白试验(即8 mL硝酸银标准溶液)所用硫氰酸铵标准溶液的体积(mL)，V为滴定过量硝酸银标准溶液所用硫氰酸铵标准溶液的体积(mL)，0.035 45 相当于 1.00 mL 硝酸银溶液[C(AgNO3)=1.000 mol/L]的氯离子质量(g)。

2.3.3 硫酸高铁铵指示剂的制备

称取40 g硫酸高铁铵，加100 mL水溶解，加入约2 mL硝酸，使棕色消失，即得。

2.3.4 供试品溶液的制备与滴定

分别精密称取3种炮制品粉末(过二号筛)5.0 g，置100 mL量瓶中，加50 mL水，超声提取20 min，使氯完全浸出，用水稀释至刻度，混匀，过滤。精密吸取滤液50 mL，置250 mL锥形瓶中，加5 mL硝酸，用微量滴定管加入8 mL硝酸银标准溶液，加热微沸，以驱除含氮氧化物，冷却，即得供试品溶液。加入2 mL硫酸高铁铵指示剂，用硫氰酸铵标准溶液滴定过量的硝酸银，直至出现粉红色为止。按以下公式进行计算，结果见表2。氯离子百分含量(%)=〔(V0-V)× C ×0.035 45/m〕×100，式中 V0为空白试验(即8 mL硝酸银标准溶液)所用硫氰酸铵标准溶液体积(mL)，V为滴定试样所用硫氰酸铵标准溶液的体积(mL);C为硫氰酸铵标准溶液的浓度(mol/L);0.035 45为相当于1.00 mL硫氰酸铵溶液〔C(NH4CNS)=1.000 mol/L〕的氯离子质量(g);m为滴定时所用的试样质量(g)。

3 讨论

硝酸根离子与氯离子均为谷芽的α-淀粉酶激活剂。本试验利用紫外分光光度法测定硝酸根，该法简便、准确，可广泛用于硝酸根离子的测定，但与文献[3]中方法略有出入。由于3种谷芽炮制品中有机物在275 nm波长处吸收较大，若用该文献中的计算方法，对结果会造成很大影响，而硝酸根在275 nm波长处几乎无吸收，所以本试验无需在275 nm波长处测定吸光度。试验结果表明，谷芽经过加热炮制后，其硝酸根离子含量降低。

硝酸银容量法系经典方法，该法简单，适用于低浓度氯离子的测定。试验中由于指示剂颜色干扰大，加上3种炮制品本身也有颜色，使得滴定终点不够明显，采用空白对照滴定，结果较准确。由试验结果可知，谷芽经过加热炮制后，其含量呈下降趋势。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:352.

[2]龚千锋.中药炮制学[M].北京:中国中医药出版社，2003:338-340.

[3]DZ/T 0064.59-93，地下水质检验方法:紫外分光光度法测定硝酸根[S].