法尼醇X受体在糖尿病肾病肾组织中的表达及意义

丁涵露，王 莉，汪 伟，邹玉荣，廖常志，张 萍

(四川省医学科学院·四川省人民医院肾内科，四川 成都 610072)

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)发病机制不完全清楚，炎症机制在DN发病中的作用正得到重视，而机体内源性抗炎机制目前研究较少。法尼醇X受体(farnesoid X receptor，FXR)是一种重要的核受体，除参与胆固醇、脂类和葡萄糖等物质代谢过程外［1，2］，还具有重要抗炎作用［3］。巨噬细胞浸润肾组织引发的炎症反应是造成DN病变持续进展的重要机制［4］，有关人类DN肾组织FXR表达及其与巨噬细胞浸润、肾损伤之间的关系目前未见报道，因此，明确FXR在糖尿病肾病肾组织中的表达及其与炎细胞浸润、肾损伤之间的关系将有助于明确DN炎症反应的调控。

1 对象与方法

1.1 研究对象 试验对象15例均为我院2005～2011年住院DN患者(DN组)，其中男7例，女8例，年龄(54±8.5)岁，均经肾活检组织病理检查确诊为DN。正常组5例，年龄(52±6.9)岁，来自我院肾肿瘤做肾切术但远离肿瘤部位的肾组织，均经光镜证实肾组织正常。

1.2 材料 兔抗人FXR多克隆抗体购于美国Ebioscience公司，小鼠抗人CD68单克隆抗体、超敏SP(鼠/兔)免疫组化试剂盒和DAB显色试剂盒购于北京中杉公司。

1.3 FXR、CD68免疫组织化学染色 石蜡切片4 μm，常规脱蜡、水洗后，3%H2O2室温 15 min，FXR行EDTA微波修复，CD68行胰酶修复，分别滴加一抗:兔抗人FXR多克隆抗体(稀释比例为1∶200)和小鼠抗人CD68抗体原液，4℃过夜。次日0.01 mol/L PBS洗5 min×3次后，即按照超敏SP免疫组化试剂盒说明书进行操作，DAB显色，苏木精复染细胞核。阴性对照以PBS代替一抗，同法操作。

1.4 肾小球病理损害程度的判定 石蜡切片行HE、PAS等常规染色，PAS染色切片在200倍视野下进行分析，每张切片选择10个正切的肾小球，计算系膜区扩张指数(以系膜区/毛细血管襻面积比表示)，取平均值作为每个标本的系膜区扩张指数［5］。……