淫羊藿苷对ConA诱导的小鼠肝脏损伤保护机理的研究①

王恒孝 任 霞 温培娥 姜国胜 (山东省医学科学院基础医学研究所，济南250062)

肝脏是机体的代谢和解毒器官，近年来研究发现肝脏中含有大量的免疫细胞，其中T淋巴细胞在病毒性和自身免疫性肝炎的发病中发挥着重要作用［1］。刀豆蛋白A(ConA)可引起小鼠肝脏NKT细胞的活化，造成肝脏免疫性损伤［2］。淫羊藿可强肾壮阳扶正固本，具有雄性激素样作用，淫羊藿苷(Icariin)为淫羊藿的提取物，具有免疫调节作用，其次级产物淫羊藿次苷对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖具有促进和抑制的双相调节作用［3］，另外淫羊藿苷可抑制炎症和肿瘤的增殖发生［4］。本实验利用C57BL/6雄性小鼠建立ConA诱导型肝炎模型，研究观察淫羊藿苷对该损伤模型保护的免疫学机制。

1 材料与方法

1.1 试剂 刀豆蛋白A(ConA)购自Sigma公司，FITC标记抗小鼠NK1.1、Cy标记的CD3抗体购自BDPharmingen公司，转氨酶测定试剂盒购自上海华盛试剂公司，IFN-γ、TNF-α ELISA 检测试剂盒购自R＆D公司 。

淫羊藿苷为课题组从淫羊藿中提取获得，纯度99.6%。淫羊藿苷干粉溶于无水乙醇，待乙醇完全挥发后用1640不完全培养液溶解，配成10 mg/ml淫羊藿苷注射液。

1.2 动物 C57BL/6雄性小鼠，20～22周龄，体重28～32克，购自北京维通利华实验动物公司。将实验小鼠随机分为淫羊藿苷+ConA组(淫羊藿苷实验组)、生理盐水+ConA组(ConA对照组)、淫羊藿苷+生理盐水组(淫羊藿苷对照组)，每组24只。淫羊藿苷实验组和淫羊藿苷对照组腹腔注射淫羊藿苷注射液，每次200 mg/kg，每日2次，连续5天，ConA对照组同期注射等剂量的生理盐水。淫羊藿苷最后一次注射后12小时，淫羊藿苷实验组和ConA对照组小鼠行尾静脉注射ConA，剂量15μg/g，淫羊藿苷对照组注射同剂量生理盐水。……