李 虎,臧恒昌,张 惠
(1.山东大学药学院,山东 济南 250012;2.山东泰邦生物制品有限公司,山东 泰安 271000;3.国家糖工程技术研究中心,山东 济南 250012)
免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)是人体含量最多的免疫球蛋白,占总血清免疫球蛋白的70% ~80%左右,相对分子质量为150 kD,是再次抗体应答中所产生的主要免疫球蛋白。成人血清中IgG含量约为7.0~16.6 g·L-1,人血清中的IgG主要为单体,包括四个亚类,其中IgG1占60% ~70%,IgG2占15~20%,IgG3占5% ~10%,IgG4占1~7%,不同亚类其重链的抗原性不同。IgG是机体抗感染免疫的主力抗体,其在体液中含量的高低往往作为慢性感染、慢性肝病、免疫性疾病等疾病的参考值,因此测定人体血清中IgG含量可对许多疾病的早期诊断提供依据。通过分离纯化健康人血浆可得到较纯的IgG制剂,如静注人免疫球蛋白等。静注人免疫球蛋白在临床上用于治疗多种免疫球蛋白缺乏症和自身免疫性疾病,如X联锁低免疫球蛋白血症、川崎病、特发性血小板减少性紫癜等[1],准确测定静注人免疫球蛋白中IgG的含量对其质量控制具有重要意义。目前测定IgG含量的方法有多种,按照其基本原理的不同可大体分为:免疫学方法、色谱分析法、生物传感器技术及共振散射法。本文对各种方法的原理及其特点作以下综述。
1.1 免疫扩散法 免疫扩散法是早期检测人IgG含量的常用方法,其原理为在一定条件下,人IgG与相应的抗体血清在凝胶中产生的沉淀环的大小与相应的抗原含量成正比。一般操作是将抗人IgG血清均匀混合于液态的琼脂或琼脂糖胶内,打孔,加样,37℃孵育24 h,用游标卡尺测定扩散环的直径,代入以不同浓度IgG标准品同法操作构建的回归方程中,计算出待测样品的IgG含量。……