I型鸭肝炎病毒VP1蛋白单克隆抗体的研制

提金凤，李志杰，王海燕，吴卫东

（1.山东畜牧兽医职业学院，潍坊 261061；2.山东省寿光市圣城畜牧兽医管理站，寿光 262700；3.山东省菏泽市畜牧局，菏泽 274000）

鸭病毒性肝炎（duck viral hepatitis，DVH）是由鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV）引起的一种传播快速、急性高度致死性传染病，主要侵害1月龄以内的雏鸭。该病于1949年由Levine和Hofstad首次发现于美国的长岛，现已呈全世界性分布，是危害养鸭业最为严重的传染病之一[1,2]。

传统上鸭病毒性肝炎的血清型可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型3个血清型，随着近几年新型鸭病毒性肝炎的出现，传统的血清分型已经不再适用[3]。目前，对鸭病毒性肝炎的分型有了新的标准，传统上的血清Ⅱ型、Ⅲ型鸭肝炎病毒被划为了星状病毒，不再属于鸭肝炎病毒。

根据近年来鸭病毒性肝炎的发病特点，鸭肝炎病毒被划分为 3个基因型，分别是基因A型（传统血清Ⅰ型）、B型（台湾新型）、C型（韩国新型）。3个基因型的病毒几乎没有抗原交叉性[4,5]。鸭肝炎病毒有VP0、VP1和VP3三种功能性结构蛋白，其中VP1由238 个氨基酸组成，其分子量为26.6 kDa。VP1 蛋白（外壳蛋白）作为主要的宿主保护蛋白，编码主要的抗原位点并具有型特异性中和位点[6，7]，主要刺激机体产生具有中和性的抗体。

目前，临床上对DVH的治疗主要是采用卵黄抗体，但有时受卵黄抗体中非特异性蛋白或抗体滴度过低的影响，治疗效果较差。针对这种情况，本研究从山东省分离出一株Ⅰ型（基因A型）DHV，然后对其进行单克隆抗体的研制，用VP1的原核表达蛋白作为筛选抗原，筛选出了具有中和性的单克隆抗体，为今后进一步用该单抗来诊断和治疗鸭病毒性肝炎提供了重要生物制剂。……