上海市猪圆环病毒2 型全基因组的克隆与序列分析

刘 健，鞠厚斌，张维谊，杨德全，王 建，刘佩红，周锦萍

（上海市动物疫病预防控制中心，上海 201103）

猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV-2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS）的主要病原。自1991年PMWS在北美洲最先发现以来，已在世界范围内流行[1]。临床症状主要表现为生长缓慢、贫血、呼吸困难、肾病、黄疸等，更重要的是，PCV-2在淋巴系统中增殖可导致机体免疫机能下降[2]，造成其他病毒、细菌性疾病的并发或继发，使病情加重。由于PCV-2 经常与多种病毒混合感染[3]，因此，能够引起猪群发生多种疾病。PMWS既可水平传播，导致断奶仔猪发病死亡，亦可垂直传播，引起繁殖障碍[4]，它给养猪业带来了很大的经济损失。

PCV-2为无囊膜环状单链的DNA病毒，基因组大小1767 bp或1768 bp，许多学者将其分为PCV-2a（PCV2-2）和 PCV-2b（PCV2-1）两种亚型，其中PCV-2a基因组全长1768 bp，主要报道的国家为中国和欧洲国家；PCV-2b基因组全长1767 bp，在世界范围内呈普遍感染状态[4]。而欧盟根据PCV-2全基因组在进化树上遗传距离大小的不同将其分为5个亚型，分别为PCV-2a、PCV-2b、PCV-2c、PCV-2d和 PCV-2e，其中 PCV-2a和 PCV-2e都属于传统分类方法中的PCV-2a，PCV-2b、PCV-2c和PCV-2d属于传统分类方法中的PCV-2b。在欧洲和北美，2种基因型均已被证实与猪圆环病毒病（porcine circovirus associated disease, PCVAD）有关，2005年美国暴发的PCVAD也被证实与PCV-2b有联系。尽管大多数猪群感染和PCV-2有关，但是有学者认为PCV-2的两个不同基因型在临床表现并不相同，即两者的毒力不同，普遍认为PCV-2b的致病性要强于PCV-2a[5]。但是也有学者认为PCV-2a和PCV-2b的毒力没有差异，并且二者存在交叉保护力[6]。

本研究采用PCR 方法从临床样品中克隆得到PCV-2的全基因组重组质粒，并对其序列进行分析，旨在探索PCV-2的变异规律，从而为研究PCV-2的分子生物学、流行病学、致病机理等奠定基础。……