恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义

张瑞萍 徐冰心 王社论 郑成中 董青 翟树森 周学慧 高云阁

（解放军第306医院肿瘤科，a特种病科，b儿科，北京 100101）

肿瘤的发生、发展与机体的免疫状态密切相关。T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞是机体抗肿瘤免疫的主要效应细胞。肿瘤患者体内存在多种类型的免疫抑制细胞，其中CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg细胞）是对正向免疫应答（包括B细胞、T细胞、抗原递呈细胞等参与的免疫应答）起负向调控作用的CD4＋的T细胞亚群[1]。研究表明，肿瘤患者外周血中Treg细胞的数量增多，这提示Treg细胞的免疫抑制作用可能与实体瘤的发生、发展关系密切[2－3]。分泌IFN-γ的CD4＋T细胞为 Th1细胞，分泌IL-4的CD4＋T细胞为Th2细胞。正常机体的Th1／Th2细胞处于动态平衡，这对维持机体的免疫功能至关重要。本研究通过流式细胞仪检测恶性肿瘤患者及健康人群外周血中的淋巴细胞亚群、Treg细胞数量以及Th1、Th2细胞，旨在了解恶性肿瘤患者的免疫状态。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2008年1月—2012年1月在解放军第306医院住院的经病理明确诊断为恶性肿瘤的患者90例（肿瘤组），其中男性48例，女性42例；年龄35～83岁，中位年龄（52.2±3.5）岁；乳腺癌12例，肺癌26例，结直肠癌20例，头颈癌5例，食管癌4例，妇科肿瘤9例，胃癌5例，肾癌5例，肝癌4例。肿瘤组患者在本研究前1个月均无化疗、放疗史，且近3个月未应用免疫制剂，无发热及输血史。另选择健康体检者60例作为对照组，其中男性35例，女性25例；年龄30～78岁，中位年龄（50.4±5.6）岁。

1.2 试剂及仪器

1.2.1 主要试剂 检测外周血Treg细胞所需的试剂：小鼠抗人CD4-FITC单克隆抗体以及小鼠抗人CD25-APC单克隆抗体均购自美国BD公司，小鼠抗人 FoxP3-PE单克隆抗体、大鼠IG2α-PE、固定／破膜浓缩剂购自G-Biosciences公司。……