哒螨灵在枸杞中的残留动态研究

胡晓岚，虞英明，张 蓉

(1.杭州澳医保灵药业有限公司，浙江杭州310022; 2.宁夏农林科学院植物保护研究所，宁夏银川750002)

哒螨灵在枸杞中的残留动态研究

胡晓岚1，虞英明1，张 蓉2

(1.杭州澳医保灵药业有限公司，浙江杭州310022; 2.宁夏农林科学院植物保护研究所，宁夏银川750002)

采用3种施药方式:推荐剂量(150mg·L－1)一次施药、加倍剂量(300mg·L－1)一次施药和推荐剂量(150mg ·L－1)二次施药，在枸杞田喷施15%哒螨灵乳油，于施药后不同时间采集鲜果，采用气相色谱法对果实样品进行分析。结果表明，在一次施药的田块，在推荐剂量和加倍剂量下，哒螨灵的24h降解率分别达到66.0%和68.5%，7d后分别达到99.1%和99.4%。经计算，药剂的降解半衰期分别为0.65、0.63d。在同为推荐剂量的条件下，二次施药可以明显提高哒螨灵在枸杞中的残留量。与现有的最高残留限量(Maximum residue limit，MRL)值相对照，在推荐剂量一次施药和加倍剂量一次施药的田块，鲜果的采集可以分别在施药的24h和3d后进行;在推荐剂量二次施药的田块，鲜果的采集可以在第二次施药7d后进行。

哒螨灵，枸杞，残留动态

枸杞属于茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium)，是一种多年生落叶灌木。枸杞的籽、花、叶、根、皮都可入药。其果实具有滋补肝肾、益精养血、明目消翳、润肺止咳的作用。枸杞在中国各地均有分布，但主要集中在西北地区，且逐渐成为栽培品种。在栽培条件下，枸杞的各个生长时期都有虫害发生，主要害虫有蚜虫、瘿螨、锈螨、瘿蚊，次要害虫包括木虱、负泥虫、跳甲等。枸杞的果实、叶、花，甚至嫩梢都会受到危害，因此不可避免地需要使用杀虫剂。哒螨灵(pyridaben)属于触杀性杀螨剂，对害螨的各个发育阶段均有防效，并且与传统杀螨剂无交互抗性。哒螨灵单剂及混剂在果园、棉田以及蔬菜地害螨的防治中有着广泛应用。人们也曾尝试以哒螨灵作为枸杞害螨的防治药剂［1－4］。但是相应的残留动态，国内外迄今未见公开报道。本文以15%哒螨灵乳油(EC)作为受试药剂，以栽培枸杞作为受试植物，采用推荐剂量(150mg·L－1)一次、加倍剂量(300mg·L－1)一次和推荐剂(150mg·L－1)量二次3种不同的方式施药，于施药后不同时间采集鲜果样品，采用气相色谱法检测样品中的哒螨灵残留，为安全用药提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

哒螨灵标准品 纯度99.8%，德国 Dr. Ehrenstorfer GmbH;乙酸乙酯、丙酮、石油醚(60～90℃)、氯化钠、无水硫酸钠、弗罗里硅土(60～100目)等试剂 均为分析纯;弗罗里硅土 用前在马福炉中600℃灼烧4h，使其活化;无水硫酸钠 用前在马福炉中300℃灼烧2h，使其彻底脱水;哒螨灵乳油西安常隆正华作物保护有限公司。

HP6890气相色谱仪，2FEC－85A旋转蒸发仪，玻璃层析柱(30×ø1.0cm)，高速组织匀浆机，分液漏斗，容量瓶，国际型振荡器等。

1.2 田间实验设计

实验于2007年夏季在宁夏农林科学院芦花台枸杞研究所实验基地进行。枸杞品种为宁杞1号，树龄5年。受试药剂为15%哒螨灵乳油。实验共包含3个施药区，施药区1:推荐剂量(150mg·L－1)一次施药，施药区2:加倍剂量(300mg·L－1)一次施药，施药区3:推荐剂量(150mg·L－1)二次施药。每个施药区设3个重复小区，每个小区包含9个植株，分别挂牌标记。施药日期为7月3日。对于施药区3，第一次施药7d后进行第二次施药。

对于施药区1和施药区2，施药后1h，1、3、5、7、14、21、28d采集成熟鲜果。每个小区采样0.5kg。采集的样品置于－20℃低温冰柜内冷藏待测。对于施药区3，第二次施药后7、14、21d采样。每个小区采样0.5kg。采集的样品置于－20℃低温冰柜内冷藏待测。

1.3 样品前处理

1.3.1 提取 将枸杞样品用高速组织匀浆机粉碎，用电子天平称取20.00g，置于250mL具塞平底烧瓶中，加入60mL丙酮，盖上塞子，在振荡器上以150r/min的速度振荡30min。将混合液转入离心管，在3000r/min转速下离心3.0min。离心后获得的上清液转入平底烧瓶，沉淀用50mL丙酮悬浮，重复一次上述操作，合并上清液于平底烧瓶中。将合并后的液体在旋转蒸发仪上以不高于40℃浓缩至约50mL。转移浓缩液到预先注入200mL 10%NaCl的500mL分液漏斗中，再加入50mL石油醚，剧烈振荡3min，静置分层。收集位于上层的石油醚萃取液，使其经过装有无水Na2SO4的三角漏斗，收集滤液置于250mL平底烧瓶中，位于下层的水相用50mL石油醚再次萃取，合并萃取液，在40℃以下减压浓缩至约2mL，室温下用N2吹干，用5mL洗脱液A(乙酸乙酯∶石油醚=5∶95，v/v)溶解残留物。待下一步净化。

1.3.2 净化 柱层析法:取内径1cm的玻璃层析柱，其中依次填入2cm无水Na2SO4、5g活化的弗罗里硅土、2cm无水Na2SO4，用橡皮锤轻轻敲实，用30mL石油醚预淋。当预淋液到达下端的无水Na2SO4时，提取液上柱。先用20mL洗脱液A淋洗(弃去滤出液);再注入50mL洗脱液B(乙酸乙酯∶石油醚= 15∶85，v/v)，收集滤液于100mL梨形烧瓶中，40℃以下减压浓缩至约2mL，室温下用N2吹干，用石油醚定容至2mL，待测。

1.4 样品检测

哒螨灵在柑桔、苹果、蔬菜、茶叶等农作物中的残留分析方法已有报道。所用的分析手段包括气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、气质联用(GCMS)、液质联用(LC－MS)等［5－11］。根据样品特点和实验室的条件，本文采用刘冬梅等［5］的分析方法并稍做调整。具体如下。

1.4.1 色谱条件 检测器:电子捕获检测器(ECD);色谱柱:HP－5石英毛细管柱(30m×ø0.32mm，0.25μm);柱温:起始温度80℃，以50℃/min的速度上升到230℃，停留1min，再以20℃/min的速度上升到260℃，停留7min;进样口温度:260℃;检测器温度:260℃;衡压模式进样(压强:10.04psi);进样量: 1μL;定量方法:外标法(峰面积)。

1.4.2 标准曲线 取哒螨灵标准品储备液，用丙酮稀释配制成2.0、1.0、0.5、0.2、0.1μg·mL－1的工作液，按照“1.4.1”规定的色谱条件进行检测，记录不同进样量对应的峰面积。以标准溶液浓度为自变量(X)，以峰面积为应变量(Y)，采用DPS建立线性回归方程。

1.4.3 添加回收 称取20g空白样品置于平底烧瓶中，分别加入浓度为0.100、1.00、10.0mg·L－1的哒螨灵标准溶液，制成药剂含量分别为0.0050、0.0500、0.5000mg·kg－1的加标样品，按“1.3”规定的方法进行样品前处理，再按“1.4.1”所设定的条件进行残留分析。

2 结果与讨论

2.1 方法灵敏度及线性范围

在本文设定的色谱条件下，样品的LOD(3倍S/N)和LOQ(10倍S/N)分别为4.0×10－4mg·kg－1和1.3×10－3mg·kg－1，样品的最小检出量为4×10－12g。符合国家农业部对于农药残留最小检出量的要求(1.0×10－9g)［5］。标准品的气相色谱图见图1。

图1 标准品气相色谱图Fig.1 GC chromatogram of a standard

测定结果表明，哒螨灵色谱峰的峰面积(Y)与进样量(X)在所测范围内有良好的线性关系，线性方程为Y=30483.2X+2550.7，r=0.9979。

2.2 添加回收率

在0.005～0.500mg a.i.·kg－1的加标范围内，哒螨灵的添加回收率介于84.4%～96.5%之间，RSD介于5.7%～7.5%之间(见表1)。检测方法符合农药残留分析要求。

表2 哒螨灵在施药区的残留动态Table 2 Residue trend of pyridaben in field

表3 哒螨灵的降解方程Table 3 Equation for degradation of pyridaben

表1 哒螨灵在枸杞中的添加回收率Table 1 Fortified recovery of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L.

2.3 样品残留动态

对采自施药区1～3的样品做残留分析，其结果见表2。图2和图3分别显示空白样品和实验样品的气相色谱图。从表2可以看出，哒螨灵在施药区1和施药区2的初始残留(即施药后1h的残留)分别为0.528mg·kg－1和1.770mg·kg－1。施药24h后，降解率分别为达到66.0%和68.5%，7d后分别为达到99.1%和99.4%。药剂残留水平之所以下降较快，一方面由于哒螨灵的挥发和光解作用，另外果实的生长稀释效应也是一个重要原因。从表2还可以看出，同属一次施药的田块，施药区2的残留量总是明显高于施药区1。这与前者的施药量(300mg·L－1)高于后者(150mg·L－1)有关。值得注意的是，药剂残留量的差异显著性在施药区1和2之间比较，与3个施药区一起比较，其结果有所不同。后一种比较显示施药区1和施药区2的残留量差异不显著，但它们均明显低于施药区3。这说明增加施药次数比提高用药量对残留水平的影响更大。

从表3可以看出，在一次施药的条件下，哒螨灵的降解动态能够较好地吻合一次动力学方程，降解半衰期在推荐剂量下为0.65d，加倍剂量下为0.63d。两者差别不大。

2.4 安全间隔期

图2 空白样品气相色谱图Fig.2 GC chromatogram of a blank sample

图3 实验样品气相色谱图Fig.3 GC chromatogram of a test sample

我国目前尚未制定哒螨灵在枸杞中的最高残留限量(MRL);英国和欧盟给出的MRL值均为0.3mg/kg［12－14］。按照上述 MRL标准，在推荐剂量(150mg·L－1)一次施药的田块，鲜果的采集可以在施药24h后进行;在加倍剂量(300mg·L－1)一次施药的田块，鲜果的采集可以在3d后进行;在推荐剂量(150mg·L－1)二次施药的田块，第二次施药7d后采集的果实是安全的。如果药农采集果实的时间点在上述安全间隔期以内，所采果实中的哒螨灵残留量有可能高于MRL，即残留超标。需要注意的是，安全间隔期与施药量和施药次数相对应。改变施药方式，安全间隔期也相应发生改变。另外，本实验在西北地区干旱长日照的气候条件下进行，依据本实验结果提出的安全间隔期对该地区的药农有较强的指导意义。在其他气候区带，哒螨灵的降解速率或快或慢，本文提出的安全间隔期仅可供相关地区药农作为参考。

3 结论

哒螨灵属于田间降解速率较快的农药。根据本实验的结果，在推荐剂量(150mg·L－1)和加倍剂量(300mg·L－1)下，其降解半衰期分别为0.65d和0.63d。在推荐剂量一次施药、加倍剂量一次施药和推荐剂量二次施药的田块，采集鲜果的安全间隔期分别为24h、3d和7d。

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［14］Security and Health Excutive－Chemicals Regulation Directorate－ MRL database［EB/OL］ .https://secure. pesticides.gov.uk/MRLs/search.asp.

Research of residue level of pyridaben in fruit of cultivated wolfberry Lycium barbayum

HU Xiao－lan1，YU Ying－ming1，ZHANG Rong2
(1.Hangzhou Aoyipollen Pharmaceutical Co.，Ltd.，Hangzhou 310022，China; 2.Institute of Plant Protection，Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences，Yinchuan 750002，China)

Field experiments were conducted to study residual trend of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L. Emulsifier concentration(EC)of pyridaben of 15%was applied in field of cultivated wolfberry Lycium barbayum in three patterns，one application at recommended rate(150mg·L－1)，one application at double rate(300mg·L－1)，and two applications at recommended rate(150mg·L－1).The fruit was collected several times after the applications，and the residues of pyridaben were analyzed by GC.Result of the study indicated that 24h degradation of the insecticide in field of one application at recommended rate and double rate were detected to be 66.0%and 68.5%，respectively，and the degradation rate 7d after the applications rose up to 99.1%and 99.4% respectively.The half－lives were calculated to be 0.65 and 0.63d，respectively.The second application significantly increased the residue level of pyridaben in case the insecticide was applied in recommended rate.It was reasonable say based on the current value of maximal residual limit(MRL)that in the field of one application at recommended rate and that of one application at double rate the fruit could be collected after 24h and 3d，respectively，and that in field of two application at recommended rate，the fruit could be collected 7d after the second application.

pyridaben;Lycium barbayum L.;residue

TS207.5+3

A

1002－0306(2012)10－0055－04

2011－09－26

胡晓岚(1966－)，女，工程师，研究方向:食品药品分析。

国家科技支撑计划(2006BAI09B04－11)。