安薇 李平 李桂香 吴红玉 金晶 李兆申 贲其稳
·论著·
胰腺癌神经浸润体外模型的构建与观察
安薇 李平 李桂香 吴红玉 金晶 李兆申 贲其稳
目的构建胰腺癌神经浸润的体外模型,并对胰腺癌细胞的神经浸润现象进行初步观察。方法将胰腺癌Capan-2细胞与大鼠背根神经节(DRG)置于Matrigel基质胶中共培养,分别建立以观察细胞集落面积(模型1)和观察细胞迁移距离(模型2)为主的两种模型。倒置显微镜下观察神经突及细胞生长情况,利用图像分析软件Image pro plus对图片进行分析。结果共培养对神经突起生长无显著影响,无论是共培养还是单培养,DRG神经突均向四周呈放射状生长。培养模型中,Capan-2细胞朝向DRG方向生长迁移,接着包绕神经突呈纺锤状,并继续向DRG爬行。在模型1的共培养组,Capan-2细胞第5天时细胞集落面积为(309.28±19.11)μm2,显著大于单培养模型的(208.57±7.94)μm2(P<0.01)。在模型2的共培养组,Capan-2细胞第5天时向DRG方向迁移了(284.1±12.9)μm,而空白基质胶一侧,细胞迁移距离<150 μm,二者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论本实验成功构建了胰腺癌神经浸润体外模型,为后续研究打下了良好的实验基础。
胰腺肿瘤; 神经浸润; 体外研究; 神经节,脊; 实验模型
胰腺癌外周神经浸润是其术后发生腹膜后转移的重要原因[1],也是独立于其他因素之外影响患者预后的重要因素[2-3]。目前研究认为,神经浸润是由神经纤维、肿瘤细胞及其微环境之间交互作用的结果,因此,建立类似神经与癌细胞共同生存的微环境尤为重要。Matrigel基质胶是源于Engelbreth-Holm-Swarm鼠肉瘤溶解的基底膜制剂,能为背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)和癌细胞共培养的三维培养体系提供类似体内肿瘤的微环境。本实验利用Matrigel基质胶,通过DRG与胰腺癌细胞共培养,构建胰腺癌神经浸润的体外模型,并对癌细胞的神经浸润机制进行初步探讨。……