Toll样受体4在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

满晓华 孙运良 龚燕芳 吴红玉 李兆申

·论著·

Toll样受体4在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

满晓华 孙运良 龚燕芳 吴红玉 李兆申

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例经病理证实的胰腺癌手术切除标本及35例癌旁正常胰腺组织中TLR4蛋白表达，采用CD31抗体标记微血管内皮细胞，计算微血管密度(MVD)。分析TLR4蛋白表达与胰腺癌临床病理特征以及MVD的相关性。结果胰腺癌组织TLR4蛋白阳性表达率和MVD分别为74.2%(46/62)和47.3±13.5，均显著高于正常胰腺组织的17.1%(6/35)和12.6±4.8(P值均<0.01)。有淋巴结转移的胰腺癌组织中TLR4蛋白阳性表达率为83.8%，显著高于无淋巴结转移的60.0%(P=0.036)；TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的胰腺癌组织中TLR4蛋白阳性表达率为85.3%，显著高于Ⅰ+Ⅱ期的60.7%(P=0.028)。MVD与肿瘤的大小、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P值分别为0.008、0.036、0.010)。胰腺癌TLR4蛋白表达与MVD呈显著正相关(γ=0.534，P<0.01)。结论TLR4参与胰腺癌的发生、发展，其机制可能与促进肿瘤血管生成有关。

Toll样受体4； 胰腺肿瘤； 血管生成，病理性； 免疫组织化学

Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)是最早发现的、同时也是研究最为广泛的TLR家族成员。近年来研究发现，TLR4在多种肿瘤细胞中呈高表达，参与了肿瘤的发生与发展[1]。本研究检测胰腺癌组织的TLR4蛋白表达，分析其与胰腺癌临床病理特征及微血管密度(microvessel density，MVD)的关系，探讨其在胰腺癌发生、发展中的作用。

材料和方法

一、标本来源

收集2006年1月至2010年12月长海医院手术切除并经病理证实且资料完整的胰腺导管腺癌标本62例，所有患者手术前均无化疗、放疗或其他针对肿瘤的治疗。另选择35例距肿瘤5 cm以上且经病理证实为正常胰腺的癌旁组织标本作为对照。

二、TLR4及MVD检测

采用免疫组化染色超敏两步法(SP染色法)，按SP免疫组化试剂盒(福州市迈新生物技术开发公司)说明书操作。兔抗人TLR4多抗(Santa Cruz公司)工作浓度1∶200，小鼠抗人CD31单抗(Neo makers公司)工作浓度1∶100。用已知TLR4表达强阳性的乳腺癌组织切片作为阳性对照，以PBS替代一抗作阴性对照。……