稳定高表达p75NGFR的胰腺原位荷瘤裸鼠模型的建立

王炜 陈晓东 朱明华 郑建明 陈颖

稳定高表达p75NGFR的胰腺原位荷瘤裸鼠模型的建立

王炜 陈晓东 朱明华 郑建明 陈颖

由于目前尚无有效的筛查和早期诊断方法,确诊时80%的胰腺癌患者已出现转移,错过了手术机会[1-3]，临床上很难获得新鲜的、不同时期的组织标本,更不可能在临床上观察胰腺癌进展过程[4]。因此,建立理想的胰腺癌动物模型，将为进一步深入研究胰腺癌的生长、侵袭和转移及其分子生物学特性提供动物实验平台。

一、材料和方法

1．材料：雄性裸鼠30只，清洁级，2周龄，体重12～18 g，购自中国科学院上海动物研究所。常规复苏前期实验建立的稳定表达p75NGFR的人胰腺癌细胞p75-SW1990[5]，以不转染的SW1990细胞和只转染空载体pCDNA3.1的细胞pC-SW1990为对照组。3组细胞分别常规培养，取对数生长期细胞，离心、重悬于37°C的生理盐水中，调整细胞浓度为4×107个/ml。

2．皮下荷瘤动物模型建立：取裸鼠15只，按数字表法随机分为3组，每组5只。分别接种p75-SW1990、SW1990、pC-SW1990细胞。具体操作如下：用0.1 ml注射器将上述3种细胞悬液分别接种于裸鼠耳后皮下，每只接种100 μl(4×106个)细胞悬液。次日开始每天观察动物生长和成瘤情况,用游标卡尺测量肿瘤大小。接种3周后处死裸鼠，取瘤体组织，部分制成冷冻切片确认组织结构，剩余部分剪切成0.1 mm3的组织块置37℃生理盐水备用。

3．胰腺原位肿瘤模型建立：另取15只裸鼠，同样随机分p75-SW1990组、SW1990组和pC-SW1990组，每组5只。将上述3种0.1 mm3的肿瘤组织块分别移植到各组裸鼠胰头部，并用细丝线固定以免组织块滑脱，关腹后置同样条件下饲养。……