黄泉智,许成勇,孙志高,杨阳,胡亚卓,陈利平,王发渭
抑郁症是一种以持续情绪低落、兴趣或愉快感丧失为主要症状的情感障碍性疾病[1]。世界卫生组织预测,到2020年抑郁障碍将成为发展中国家最严重的疾病负担,人类死亡、残疾的第2大原因,女性死亡和残疾的首位疾病[2]。有研究显示,慢性应激增加海马神经元凋亡,引起海马结构和功能的变化,参与抑郁症的发病[3]。本实验通过观察抑郁模型大鼠海马区凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax表达的变化,探索舒郁宁心汤抗抑郁功效的可能机理。
1.1 材料
1.1.1 实验动物 SPF级雄性SD大鼠70只,体重(200±20)g,解放军总医院实验动物中心提供,许可证编号:SLXK京2009-0007。
1.1.2 药物 盐酸氟西汀分散片:PATHEON FRANCE公司(批号:9711B),20 mg/粒,蒸馏水配成浓度为0.4 mg/ml的混悬液,现用现配。舒郁宁心汤由柴胡、郁金、栀子、茯神、酸枣仁组成,解放军总医院中药房鉴定提供,上药浸泡、煎煮、过滤,于80℃恒温水浴中浓缩至含生药量5 g/ml药液,4℃冰箱保存备用。
1.1.3 主要试剂及设备 Bcl-2多克隆抗体(批号:990785W)和Bax多克隆抗体(批号:909901W):北京博奥森生物技术有限公司产品;二抗显色试剂盒:EnVision Detection Kit基因科技(上海)有限公司产品(Code No.GK500705);全自动真空脱水机(LEICA ASP300)、组织包埋机(LEICA EG1140H)、石蜡切片机(LEICA RM2135)、展片机(LEICA HI1210):德国LEICA公司;光学显微镜:日本OLYMPUS BX60系统显微镜。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组及模型建立 动物饲喂于解放军总医院实验动物中心SPF级啮齿类动物实验室,温度20℃~24℃,噪声≤60 dB,昼夜节律12/12 h。大鼠自由摄食和饮水,适应性饲养7 d后行旷场(open-field)试验进行行为学评分,选择得分相近的60只随机分为6组:对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、盐酸氟西汀组,每组10只。……