苹果汁荧光特性的研究

2012-12-02 00:58左锦静
食品研究与开发 2012年9期
关键词:激发光谱荧光法苹果汁

左锦静

(河南工业贸易职业学院,河南 郑州 450012)

按照果汁的定义,可以把任何添加了外来物质的果汁说成掺假果汁,因为在果汁类产品中添加任何外来物质都是不被允许的,除了在生产还原果汁时,才可在浓缩果汁原料中添加果汁浓缩时失去的量相同的水[1]。目前,苹果汁的掺假主要有以下3种方式:第1种是以香精、糖精、色素和水等为原料而调配成的完全配制型苹果汁;第2种掺假不容易被测出,是通过将梨汁等一些更廉价的果汁掺入苹果汁中,而掺假。第3种掺假方式是以水或糖等其他成分增加苹果汁的体积,当这种达到掺假苹果汁体积被增加到10%至30%就难于检测了。此外,果汁或果汁饮料还有其他掺假形式,例如灭菌或还原果汁冒称鲜榨果汁,不标明防腐剂和色素等添加物质,假冒原果汁的含量等。近年来,针对果汁掺假问题,国内外许多学者进行了不同程度的研究,取得了较好成果[2]。

目前荧光分析法已经被应用于果汁的检测研究。如胡耀星,袁三喜等,用荧光法鉴定柑橘汁饮料掺假[3],该方法快速、简单、准确、灵敏度高。2009年,表面荧光法激发-发射矩阵应用于评估热处理苹果汁中的非酶褐变,该方法为监控果汁的非酶褐变提供了一个可行的方法[4]。本文利用荧光分光光度计研究了苹果汁的荧光特性,以期为荧光法快速鉴别苹果汁掺假提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

100%苹果汁:从超市随机取样4种。分别为塞浦丽娜100%苹果汁、大湖100%苹果汁、汇源100%苹果汁和发那100%苹果汁。

1.2 仪器

Cary Eclipse荧光分光光度计:美国,瓦里安公司。

1.3 方法

1.3.1 原材料处理

100%苹果汁饮料用离心机过滤,8000 r/min离心10 min,然后通过0.45μm的针头过滤膜,滤液备用。离心后的上清液用滤纸过滤,收集滤液,备用。

1.3.2 荧光分光光度计仪器参数设置

扫描速度,中速(600 nm/min);平均时间:0.1 s;灵敏度高;激发夹缝:5 nm;发射夹缝:5 nm。

1.4 苹果汁荧光特性的确定

1)零级激发光谱上荧光强度最大处波长的确定:分别对4种不同品牌100%苹果汁进行零级激发扫描,得到零级激发光谱,选择峰波长(可能是多个),分别设其为激发波长并扫描得到发射光谱,选发射光谱上强度最大处波长为发射波长,回扫激发光谱,对照得到的激发光谱和发射光谱是否呈镜像对称。

2)对4种不同品牌100%苹果汁,由上一步可选取零级激发光谱上荧光强度最大处的波长,并以该波长附近范围为激发波长分别进行3D发射扫描,得一系列发射光谱图,由图上可看出发射峰的大致波长范围,以该波长范围为发射波长范围进行3D激发扫描,得一系列激发光谱图。

3)将上一步所得的4种不同品牌100%苹果汁的激发光谱图进行比较,结合荧光强度,选出最佳激发波长。

4)在上一步选定的最佳激发波长条件下,分别对4种不同品牌100%苹果汁进行发射扫描,看其在此处是否都有一定强度的荧光发射,并可确定苹果汁在此激发波长下的发射峰范围。

5)得到本实验的工作波长及苹果汁的荧光光谱特性。

2 结果与讨论

2.1 苹果汁荧光特性的确定(以塞浦丽娜100%苹果汁为例)

对塞浦丽娜100%苹果汁进行零级激发扫描,得到零级激发光谱图,见图1。

图1 塞浦丽娜100%苹果汁零级激发光谱图Fi.1 Zero level excitation spectrum of 100%Cyprina apple juice

由图1可以看出,在380、616、791 nm处分别有较强荧光强度的体现,分别以以上3处波长为激发波长进行荧光发射扫描,只有当激发波长为380 nm时有发射峰(峰值为461 nm),而零级激发光谱上870 nm以后的峰显然可不予考虑,再以461 nm为发射波长进行荧光激发扫描,得到461 nm发射波长下的激发光谱,对比知其与380 nm激发波长下的发射光谱呈镜像对称,见图2。

图2 380nm激发下的发射光谱及461 nm发射下的激发光谱Fig.2 380 nm emission spectrum and 461 nm excitation spectrum of 100%Cyprina apple juice

由图2可知,零级激发光谱图上380 nm处附近苹果汁具有荧光特性。

2.2 苹果汁激发波长的确定

以380 nm波长附近范围为激发波长对塞浦丽娜100%苹果汁进行3D发射扫描,得其一系列发射光谱,见图3。

图3 塞浦丽娜牌100%苹果汁360 nm~400 nm的3D发射光谱图Fig.3 3D emission spectrum from 360 nm to 400 nm of 100%Cyprina apple juice

由图3可选取450 nm附近范围为发射波长(本文选440 nm~490 nm)进行荧光激发扫描,得一系列荧光激发光谱,见图4。

图4 塞浦丽娜牌100%苹果汁440 nm~490 nm的3D激发光谱Fig.4 3D excitation spectrum from 440 nm to 490 nm of 100%Cyprina apple juice

同理,可以得到其他3种100%苹果汁的3D激发光谱图,见图5~图7。

由4种苹果汁一系列激发光谱图中荧光强度大小可以大致选定379 nm为最佳激发波长。

2.3 苹果汁发射波长的确定

以379 nm为激发波长,分别对4种100%苹果汁进行发射扫描,得到其各自的发射光谱,见图8。

图5 大湖100%苹果汁450 nm~470 nm的3D激发光谱Fig.5 3D excitation spectrum from 450 nm to 470 nm of 100%Dahu apple juice

图6 汇源100%苹果汁450 nm~495nm的3D激发光谱Fig.6 3D excitation spectrum from 450 nm to 495 nm of 100%Huiyuan apple juice

图7 发那100%苹果汁450 nm~490 nm的3D激发光谱Fig.7 3D excitation spectrum from 450 nm to 490 nm of 100%Fana apple juice

图8 4种100%苹果汁379 nm发射光谱图Fig.8 The emission spectrum under379nmof four100%apple juice

由图8可知,在379 nm激发波长处4种100%苹果汁均有一定强度的荧光发射,故选379 nm为最佳激发波长符合要求;也可知,100%苹果汁的荧光特性为:在379 nm激发波长激发下,在454 nm~465 nm处附近有最大发射峰。可知选择463 nm为发射波长较为合适。

3 结论

1)4种100%苹果汁在一定波长下有荧光特性。

2)4种100%苹果汁在激发波长379 nm,发射波长463 nm处有最大的荧光强度。

[1]朱孔岳,周静,高一璇,等.苹果汁中果汁含量测定方法研究[J].检测与分析,2010,13(5):29-33

[2]韩建勋,陈颖,黄文胜,等.苹果汁鉴伪技术研究进展[J].食品科技,2008(8):205-208

[3]胡耀星,袁三喜.荧光法鉴定柑桔汁饮料掺假[J].分析检测,2005,26(5):166-168

[4]Dazhou Zhu,Baoping Ji.Evaluation of the non-enzymatic browning in thermally processed apple juice by front-face fluorescence spectroscopy[J].Food chemistry,2009(113):272-279

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