HR-HPV DNA PCR联合TCT检测对宫颈癌前病变的诊断价值

陈炎添，陈青龙，熊 燕，苏雪棠，黄伟刚，石 胜，郭翼华，陈荣策

(江门市人民医院检验科，广东江门529020)

宫颈癌作为妇科生殖道三大恶性肿瘤之一，严重影响女性身心健康及生命安全。我国宫颈癌的发病率及病死率比较高，年发病率超过全世界发病率的30%，每年大约死于宫颈癌的患者约有5万人［1］。有文献报道，早期宫颈癌患者的5年治愈率可高达90%，所以早发现、早诊断、早治疗对于宫颈上皮内瘤变的患者有重大的意义［2］。人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)的持续感染是癌前病变及宫颈癌发病的重要致病因子［3］，有学者将高危型(higu risk，HR)-HPV DNA检测作为宫颈癌筛查方法之一［4］。本研究拟探讨宫颈液基薄层细胞学检查(thinprep cytology test，TCT)联合 HRHPV DNA聚合酶链反应(PCR)检测在提高宫颈癌前病变的早期诊断中的价值。

材料和方法

一、研究对象

收集2009年10月至2011年9月来江门市人民医院妇产科门诊进行宫颈癌前病变筛查的女性948例，年龄20～65岁，平均年龄41.8岁，所有病例均无子宫颈锥切、急性生殖道炎症及子宫切除等病史。

二、仪器、试剂及试验方法

1.HPV DNA PCR 采用广州中山大学达安基因股份公司生产的核酸扩增仪DA-7600型检测系统进行PCR扩增、杂交、洗膜及显色，使用原装配套试剂HR-HPV(18个型)核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)，可同时检测18种HR-HPV亚型，包括 HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4。用宫颈刷置于宫颈口转动4圈，以取得足量的分泌物及脱落细胞，然后将宫颈刷放入备有1 mL洗脱液的专用洗脱管中送检或保存于-20℃冰箱待测。检测时将宫颈刷在洗脱管中充分漂洗，把洗脱液全部转移到1.5 mL微量离心管中，11 600×g离心10 mim，弃去上清液，保留管底的细胞块。……