表面活性剂与β-环化糊精共同作用对放线菌羟基化维生素D3的影响

王国盼，苏宏飞，+，韦春葵，熊思驰，黄 飞，李 丽，黄时海，*

（1.广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530005；2.南宁高新区，广西南宁530007）

维生素D3羟基化成活性形式如1α羟基维生素D3、25羟基维生素D3和1α，25位二羟基维生素D3才能发挥生理活性[1]。研究发现活性维生素D3可调节细胞繁殖和分化[2]。活性维生素D3广泛应用于一些疾病的临床治疗[3]。许多丝状真菌及放线菌具有甾醇羟基化能力，该羟基化作用主要由P450酶催化[4]。微生物的P450和电子传递链相关的蛋白大都在于细胞质或细胞质膜，属于胞内酶。因此发酵往往受到细胞壁和细胞膜的影响。维生素D3并非P450羟化酶的天然底物[5]，因此研究作用于细胞膜、细胞壁和底物的物质对于微生物羟基化甾醇和维生素D3具有重要意义。近年来，β-环糊精与表面活性剂等在水溶液中的相互作用对于生命科学相关的囊泡形成以及蛋白质分子折叠有重要影响[6]。水相中β-环糊精与表面活性剂的相互作用主要是前者的憎水性分子内孔容纳后者的疏水性基团形成包合物[7]。有些表面活性剂通透性，活化微生物细胞膜并促进底物、产物的传递和运输，从而影响物质代谢和细胞生长。Fu jii Y等[5]研究证明，β-环糊精能提高25位羟化维生素D3产率。前期实验中紫外诱变选育获得了一株产维生素D羟化酶的放线菌CXX-10突变株。其所产羟化酶为胞内酶，若直接用菌体转化反应，细胞壁及细胞膜会阻碍底物及产物在细胞内外的交换，羟基化产率较低。因此寻找一种既能使产羟化酶菌株细胞膜活化，又不与维生素D3竞争包容于β-环糊精的表面活性剂，对共同发挥两者的促发酵优势是必要和可行的。……