慢性乙肝患者血清HBV cccDNA检测的临床意义

杨彩娥，黄丽琴，孙 彬，何菊芳，韩 冰

1解放军第309医院 检验科，北京 100091；2河北北方学院，河北张家口 075000

目前慢性乙肝的实验室检查常采用免疫学指标HBeAg、HBV DNA反映病毒复制情况，其特异性好但灵敏度相对较低；采用生化指标ALT、AST、TBIL反映肝细胞损伤程度，其灵敏度好但特异性相对较差。共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV基因组复制中间体mRNA和前基因组RNA的模板，可长期存在于细胞核中，是HBV持续感染的关键，也是乙肝慢性化的主要原因[1-2]。当肝细胞变性坏死时，肝细胞核内的cccDNA可释放入血。有研究表明血清cccDNA与肝内cccDNA有非常好的相关性[3]，且血清cccDNA可反映肝细胞损伤的严重程度。本文通过对58例慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA与现有血清学指标的相关性分析，探讨其在慢性乙肝患者病毒复制和肝细胞损伤评价中的意义。

材料和方法

1 标本采集及保存 标本来自解放军第309医院2009年5月-2012年5月58例门诊和住院慢性乙肝患者，其中男48例，女10例。年龄18~80岁，平均46.25岁。诊断符合2010年修订的《慢性乙型肝炎防治指南》[4]，排除甲、丙、丁、戊型肝炎和其他原因所致的肝损害。依据肝组织切片的病理组织学结果将肝组织炎症分为轻度(G1-2)、中度至重度(G3-4)。诊断标准见《病毒性肝炎防治方案》[5]。抽取患者空腹静脉血5 ml，待完全凝固后3 000 r/min离心10 min，分离血清置-80℃冰箱保存。

2 主要仪器与试剂 1)仪器：德国艾本德股份公司(Eppendorf)的Mastercycler ep realplex实时荧光定量PCR仪，罗氏公司的C6000免疫分析仪，日立Hi7600全自动生化分析仪。2)试剂：北京索奥生物医药科技有限公司的乙型肝炎病毒cccDNA核酸扩增检测试剂盒检测HBV cccDNA；……