山楂叶总黄酮对大鼠慢性脑缺血时星形胶质细胞GFAP表达的影响

封献敬，曹娜娜，檀荣方，许 丽，武世超，吴晓光

(1.承德医学院临床医学系2011级，河北承德 067000;2.指导老师)

中枢神经系统主要由神经元和神经胶质细胞组成，其中星形胶质细胞数量最多，约占胶质细胞总数的70%。它不仅对神经元起支持、保护和营养作用，更能促进神经元的生长，提高神经元兴奋活性。但当慢性脑缺血时，星形胶质细胞过度反应性增生，可产生多种细胞因子和炎性介质，并可通过释放细胞毒性物质和炎症介质发挥神经毒性作用，抑制神经的再生功能，加重神经元的损伤。胶质源性纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic portein，GFAP)是星形胶质细胞特有的一种细胞骨架蛋白，GFAP表达的多少可以反映星形胶质细胞的功能状态。研究表明，山楂叶总黄酮(total flavone of hawthorn leaf，TFHL)对脑缺血神经元损伤具有保护作用[1]。但TFHL对星形胶质细胞的影响未见报道。本研究通过观察TFHL对慢性脑缺血损伤后星形胶质细胞反应性增生的影响，进一步探究TFHL对慢性脑缺血神经组织的干预机制。

1 材料与方法

1.1 动物与分组 成年雄性清洁级Spague-Dawley大鼠，24只，体质量250-280g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号:scxk(京)2006-2009。大鼠适应饲养一周，随机分为假手术组、模型组、TFHL组，每组8只。

1.2 药物与试剂 TFHL，山西振东泰盛制药有限公司提供，纯度98%，用蒸馏水配制，浓度为140mg/ml。GFAP抗体(免抗)、SABC免疫组化试剂盒、DAB试剂盒，均购自武汉博士德生物科技有限公司。

1.3 动物模型制备及给药 模型组、TFHL组均采用结扎双侧颈总动脉的方法制备慢性脑缺血模型:2%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉，颈部正中矢状切口，钝性分离皮下组织及筋膜，在颈动脉三角处游离出双侧颈总动脉，结扎并切断双侧颈总动脉，缝合切口，术后24h内未苏醒者剔除，并及时补遗。……