赵天一,姜彤伟,张永和
(长春中医药大学,吉林长春 130117)
鹿茸是名贵的动物药,多肽中含有多肽、多糖、生长因子等多种成分,近年来,有研究[1]显示,鹿茸多肽对心肌缺血有保护作用,能减少心肌缺血面积,调节心肌细胞膜和微粒体膜的稳定性,避免钙离子内流引起细胞超负荷,以减轻心肌细胞损伤。但其对是否抑制细胞凋亡并不清楚。心肌梗死和急性心肌缺血等疾病与心肌的细胞凋亡有关[2],本实验通过观察鹿茸多肽对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白的影响,探讨其对心肌缺血大鼠的保护作用机制。
1.1 实验动物 清洁级Wistar大鼠,体质量(220±20)g,60只,雌雄各半,由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供,合格证号为:SCXK(吉)2011-0004。
1.2 实验试剂 鹿茸多肽(分子量3 000 Da-10 000 Da)冻干粉,由长春中医药大学研发中心提供,批号:20120302。维生素C丸,由东北制药集团沈阳第一制药有限公司生产,批号:120301。注射用青霉素钠,由华北制药股份有限公司,批号为X1112413。Bcl-2和Bax蛋白酶联免疫试剂盒由南京建成科技有限公司出品,批号为:20120603。
1.3 实验仪器 FSH-2A型可调高速匀浆机为江苏省金坛县望华科教仪器厂出品,BIO RAD-680型酶标仪由日本出品及德国Biofuge stratos型台式高速冷冻离心机。
2.1 动物模型的复制 大鼠以乙醚吸入式麻醉,胸部备皮去毛消毒,围绕正中线做荷包缝合,正中线作约2 cm长的纵向切口,钝性分离胸大肌,暴露胸骨、肋骨,用小拉钩将4、5肋间分开,完全暴露心脏,剥脱心包膜,以左心耳与动脉圆锥之间的静脉为标志,将左冠状动脉前降支用缝合线结扎,心脏放回胸腔,挤出空气,逐层关闭胸腔,缝合外皮,等待苏醒[3]。……