刘焕春
现如今血液中胆红素是临床上常用检测项目,也是反应黄疸程度的重要指标。为了解用肝素抗凝血浆测定总胆红素与用血清做标本测定总胆红素的区别,我们通过对150例患者标本血浆血清中的总胆红素做对比得知,血浆测定总胆红素比血清测总胆红素偏高。
1.1 仪器 长春迪瑞生化分析仪CS-400A。
1.2 试剂
1.2.1 抗凝剂 肝素钠采用天津生物化学制药有限公司生产的批号为:20091415。
1.2.2 试剂 采用长春迪瑞公司生产的总胆红素试剂。
1.3 方法原理 本试剂采用表面活性剂作为增溶剂。样品中结合胆红素和经增溶的未结合胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应,生成酸性的偶氮胆红素,其在750 nm处光吸收值得增加与样品中胆红素的浓度成正比,通过测定570 nm处吸光度值得变化,即可计算出样品中总胆红素的浓度。双光束分析时,空白波长应设定在750 nm。
1.4 操作方法
1.4.1 标本采集 选择150例来院就诊的患者,按常规方法抽取静脉血5 ml,分别注入两只试管,一支肝素钠抗凝,一支不抗凝,分别离心。
1.4.2 操作 采用同一仪器,同一试剂,同一方法,尽可能做到条件一致分别对150例的血浆血清标本测定总胆红素的含量,结果如下。
150例血浆血清总胆红素含量(mmmol/L)见表1。
肝素钠是一种含有硫酸基团的粘多糖,分子量为1200。常带负电荷,是直接抗凝剂。可加速和增强抗凝血酶原Ⅲ,拮抗凝血酶和其他活化凝血因子的作用,使凝血酶和活化因子灭活,达到抗凝目的。肝素的抗凝能力为:1 ml全血/0.1 mg肝素。即1 ml全血10.0~12.5 U肝素[2]当以此比例抗凝时总胆红素测定基本无影响,但在实际抽血时,有些患者血管难找,血管细等等我们很难做到这个比例,为此使得抗凝剂的含量相对增加。由于总胆红素试剂R1中的表面活性剂的主要成分是十二烷基二甲基液化铵,它是一种季铵盐,其水溶液形成强碱性季钠碱,过量的肝素与十二烷基二甲基液化铵在水中反应,生成不溶于水的盐类结晶物,使反应液的吸光度增高,造成总胆红素测定值假性升高[1]。
综上说述,为确保总胆红素检测结果的准确可靠,应尽量采用血清标本,而不宜采用肝素钠抗凝血浆[3]。
表1
[1]叶应妩.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,5.
[2]郝少丽.肝素抗凝血对胆红素测定结果的影响.承德医学院,2000,17(3):61-63.
[3]王文贤,张小平,罗云.四川省卫生管理干部学报.2005,24(3):167-168.