吲哚-2，3-二酮对小鼠骨髓细胞微核和染色体的影响

孙慧莉，武建凤

(滨州医学院附属医院，山东滨州256602)

吲哚-2，3-二酮(ISA)又名靛红，系天然存在的吲哚类化合物，存在于人体和中药青黛以及大青叶中，是目前国内自行研制开发的Ⅰ类抗癌新药靛玉红化学二聚体结构的单体。该物质也存在于龙虾体内，是龙虾生存所必需的一种天然海洋活性物质［1］。研究表明，ISA有促进人和小鼠神经母瘤细胞凋亡的作用［2］。2012～2013年，我们观察了ISA对小鼠骨髓细胞微核和染色体的影响及其安全性。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 昆明种小鼠(二级)100只，雌雄各半，体质量18～22 g，由河北医科大学实验动物中心提供。ISA(上海宜博生物医药科技有限公司)，秋水仙素(PH0025，Sigma)，甲醇、冰醋酸、KCl溶液均为分析纯，小牛血清，Giemsa储备液，pH6.8的磷酸盐缓冲液。

1.2 方法

1.2.1 骨髓细胞微核染毒试验 随机取50只小鼠，均分为5组，分别为阳性对照组、阴性对照组及ISA低、中、高剂量组。阳性对照组给予环磷酰胺0.2 mg/(10 g·d)，阴性对照组给予1 mL/d生理盐水［3］;ISA 低、中、高剂量组分别给予 ISA 0.2、0.6、1.8 mg/(10 g·d)腹腔注射，连续4 d，于最后1次注射后24、48、72 h 取样。

1.2.2 骨髓细胞微核标本制备及分析 采用颈椎脱臼法处死小鼠，迅速剪取胸骨，剔去肌肉，用干净纱布擦拭，剪去每节骨骺端，用止血钳挤出骨髓液，点在载玻片一端预先滴好的小牛血清中，混匀后推片。甲醇固定15 min，Giemsa染色15 min，冲洗、晾干。依次经低倍镜、高倍镜粗检后，选择细胞分布均匀、形态完整、染色良好的区域镜检，然后在油镜下按一定顺序计数微核，计数1 000个嗜多染红细胞(PCE)中含微核的PCE数，并计算200个细胞中PCE/正染红细胞(NCE)值。……