鸡冠花的化学成分研究

张洪财，张婷婷，杜 冰，陈大忠*，李智刚

(1.黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨 150040;2.牡丹江医学院红旗医院普外科，黑龙江牡丹江 157011)

鸡冠花Celosia cristata L.又名鸡髻花、老来红、鸡公花，为苋科Amaranthaceae青葙属一年生草本，原产于美洲热带、印度和非洲［1］。现我国已有大面积的种植［2］。鸡冠花花序入药首载于《滇南本草》，味甘，性凉，入肝、大肠经，具有收敛止血，止带止痢之功效［3］。其活性成分主要有黄酮类、皂苷等化合物［4-5］，具有调节免疫、促进骨骼发育、抗阴道毛滴虫、止血、抗衰老及保肝等作用［6-10］。有关鸡冠花化学成分研究的报道较少，有文献报道鸡冠花种子中分离得到三萜皂苷类成分［5-6］。

为明确鸡冠花的药用价值，进一步弄清该植物的生理活性部位及其活性成分物质基础，对鸡冠花花序的化学成分进行研究，以期为鸡冠花的开发利用提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料 鸡冠花采摘自黑龙江中医药大学药用植物园，并经黑龙江中医药大学药学院生药学教研室孙慧峰教授鉴定为苋科青葙属植物鸡冠花Celosia cristata L.。标本(20110912)保存于黑龙江中医药大学中医药研究院。

1.2 仪器 Bruker-400超导核磁共振光谱仪(美国Bruker公司)，Agilent 1100制备型HPLC(美国Agilent公司，G1361A型泵，G1315B型UV-vis检测器)，Agilent 1100 Series LC ChemStation工作站，C18反相色谱柱(ZORBAX SB-C18，9.4 mm×25 cm，5μm);FTIR7600型傅立叶红外光谱仪(天津天光光学仪器有限公司);柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂，140～200、200～300目);薄层色谱用硅胶板(Silica gel60 F254)和TLC Silica gel60 Rp-18 F254s(Rp-18)为德国Merck公司产品;柱色谱用反相ODS(ODS-AM)为日本YMC公司产品;甲醇、乙醇、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等试剂均为分析纯。

2 提取和分离

鸡冠花花序10 kg，剪成小块，以60%乙醇室温浸泡后加热回流提取3次，每次3 h。合并提取液，减压回收溶剂后用蒸馏水混悬，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取至无色，各萃取液分别回收溶剂。

正丁醇部位(230 g)以适量的水溶解，AB-8大孔树脂吸附，依次用水、30%乙醇、50%乙醇和95%乙醇梯度洗脱，得到的各洗脱液分别减压浓缩干燥。得30%乙醇部分37.5 g。

鸡冠花正丁醇提取部位的30%乙醇部分(37.5 g)经硅胶柱层析，二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)梯度洗脱，得到6个组份(F1～F6)。F2部分(1.2 g)经ODS硅胶柱层析分离，得到化合物3(4.7 mg)。F3部分(1.5 g)经正相硅胶柱层析，结合甲醇重结晶得到化合物2(4.3 mg)。F4(6.8 g)部分经ODS柱层析结合HPLC(制备型)分离得到化合物1(5.0 mg)、化合物4(8 mg)。F5(8.7 g)经ODS柱层析和HPLC(制备型)分离得到化合物5(12 mg)、化合物6(85.0 mg)、化合物7(7.2 mg)。

3 结构鉴定

化合物1:白色无定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 461.1589［M+H］+，分子式C20H28O12，计算不饱和度为7。1H-NMR(CD3OD)δ:6.22(1H，d，J=2.3 Hz，H-3)，6.16(1H，d，J=2.3 Hz，H-5)，5.44(1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，5.05(1H，d，J=7.3 Hz，H-1')，4.04(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.92(1H，d，J=1.5 Hz，H-2″)，3.90(3H，s，6-OCH3)，3.79(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.61(2H，dd，J=14.0，6.0 Hz，H-6')，3.50(2H，s，H-5″)，2.58(3H，s，-CH3)。13C-NMR(CD3OD)δ:204.9(C=O)，167.7(C-2)，165.4(C-4)，164.7(C-6)，107.8(C-1)，97.7(C-3)，92.8(C-5)，56.4(6-OCH3)，33.2(8-CH3)，100.1(C-1')，78.1(C-2')，78.4(C-3')，71.4(C-4')，78.5(C-5')，62.5(C-6')，110.1(C-1″)，78.5(C-2″)，80.8(C-3″)，75.5(C-4″)，66.0(C-5″)。以上数据与文献［11］报道的数据一致，故鉴定为4-O-β-D-芹糖-(1→2)-β-D-葡萄糖-2-羟基-6 甲氧基苯乙酮 ［4-O-β-D-apifuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxy-6-methoxy-acetophenone］。

化合物2:无色颗粒状结晶，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 327.1009［M+H］+，分子式C15H18O8，计算不饱和度为7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.63(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.39(2H，d，J=8.6 Hz，H-2，6)，6.72(2H，d，J=8.6 Hz，H-3，5)，6.27(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，5.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-1')，3.75(1H，dd，J=11.9 Hz，1.6 Hz，H-6'a)，3.59(1H，dd，J=12.04.5 Hz，H-6'b)。13C-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:167.7(C=O)，161.6(C-4)，148.0(C-7)，131.4(C-2，6)，127.0(C-1)，116.9(C-3，5)，114.5(C-8)，95.8(C-1')，78.8(C-3')，78.0(C-5')，74.1(C-2')，71.1(C-4')，62.4(C-6')。以上数据与文献［12］报道基本一致，故鉴定为对羟基苯丙烯酸葡萄糖酯(p-coumaric acid glucoside)。

化合物3:白色针状结晶，易溶于甲醇。HRESI-MS m/z 373.1426［M+H］+，分子式 C17H24O9，计算不饱和度为6。1H-NMR(CD3OD)δ:6.75(2H，m，H-3，5)，6.50(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.33(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.22(2H，dd，J=1.4，5.6 Hz，H-8)，3.85(6H，s，OCH3-2，6)，3.78(1H，dd，J=12.0，2.4 Hz，H-6'a)，3.67(1H，dd，J=12.0，5.2 Hz，H-6'b)。13C-NMR(CD3OD)δ:154.4(C-2，6)，135.9(C-1)，135.3(C-4)，131.3(C-8)，130.0(C-7)，105.4(C-3，5)，105.3(C-1')，78.4(C-3')，77.8(C-5')，75.7(C-2')，71.3(C-4')，64.4(C-9)，63.6(C-6')，57.0(2×-OCH3)，以上数据与文献［13］报道的紫丁香苷(syringin)的数据一致。

化合物4:无色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 443.1847［M+H］+，分子式 C21H30O10，计算不饱和度为 7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.07(1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，6.82(1H，d，J=1.8 Hz，H-3)，6.74(1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-5)，5.96(1H，ddt，J=16.9，10，2.0 Hz，H-8)，5.08(1H，dd，J=16.9，2.0 Hz，H-9b)，5.04(1H，dd，J=10，2.0 Hz，H-9a)，4.96(2H，dd，J=2.4，9.4 Hz，H-7)，4.95(1H，d，J=2.4 Hz，H-1″)，4.79(1H，d，J=7.2 Hz，H-1')，3.99(1H，dd，J=1.5，11.0 Hz，H-6')，3.73(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″a)，3.94(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″b)，3.88(1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，3.84(3H，s， OCH3)， 3.56(2H， s， H-5″)。13C-NMR(CD3OD)δ:150.8(C-2)，146.3(C-1)，139.0(C-8)，136.5(C-4)，122.2(C-5)，118.4(C-3)，115.9(C-9)，114.1(C-6)，111.0(C-1″)，103.1(C-1')，80.5(C-3″)，78.0(C-3')，77.8(C-5')，77.0(C-2″)，75.0(C-4″)，74.9(C-2')，71.6(C-4')，68.7(C-6')，65.6(C-5″)，56.7(OCH3-2)，40.8(C-7)。以上数据与文献［14］报道的数据一致，故鉴定为丁香酚-O-β-芹糖-(1→6)-O-β-葡萄糖苷 ［eugenyl-O-β-apiofuranosyl-(1→6)-O-βglucopyranoside］。

化合物5:无定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 231.1062 ［M+H］+，分子式C13H14N2O2，计算不饱和度为 8。1H-NMR(CD3OD)δ:1.73(3H，d，J=6.7 Hz，H-10)，3.01(1H，dd，J=16.0，12.0 Hz，H-4a)，3.43(1H，dd，J=16.0，5 Hz，H-4b)，3.95(1H，dd，J=12.0，5 Hz，H-3)，4.69(1H，q，J=6.6 Hz，H-1)，7.03(1H，t，J=7.4 Hz，H-6)，7.13(1H，t，J=7.4 Hz，H-7)，7.33(1H，d，J=7.8 Hz，H-8)，7.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)。13C-NMR(CD3OD)δ:51.1(C-1)，59.8(C-3)，24.4(C-4)，107.9(C-4a)，127.5(C-4b)，119.2(C-5)，120.5(C-6)，123.3(C-7)，112.3(C-8)，138.6(C-8a)，131.4(C-9a)，17.2(C-10)，173.7(C-11)。以上数据与文献［15］报道的基本一致，故鉴定为(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢化-β-咔啉-3-甲酸 ［(1S，3S)-1-Methyl-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid］。

化合物6:黄色晶体，易溶于甲醇、二甲基亚砜。HR-ESI-MS m/z 757.2121［M+H］+，分子式C33H40O20，计算不饱和度为14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.03(2H，d，J=8.8 Hz，H-2'，6')，6.89(2H，d，J=8.8 Hz，H-3'，5')，6.40(1H，brs，H-8)，6.18(1H，brs，H-6)，5.65(1H，d，J=7.0 Hz，H-1″)，4.28(1H，d，J=7.8 Hz，H-1‴)，3.69(2H，dd，J=9.4，2.7 Hz，H-6‴)，3.58(2H，t，J=11.6 Hz，H-6″)，0.85(3H，d，J=6.1 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，165.3(C-7)，161.1(C-5)，159.9(C-4')，156.4(C-2)，156.0(C-9)，132.5(C-3)，130.7(C-2'，6')，120.8(C-1')，115.1(C-3'，5')，104.9(C-1‴)，103.5(C-10)，100.5(C-1″″)，99.0(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，83.0(C-2″)，77.4(C-5″)，77.1(C-3‴)，76.9(C-3″)，76.5(C-5‴)，74.4(C-2‴)，72.4(C-4″″)，70.4(C-2″″)，70.1(C-3″″)，69.7(C-4″)，66.7(C-4‴)，63.0(C-5″″)，62.7(C-6‴)，60.9(C-6″)，17(C-6″″)。以上数据与文献［16］报道的基本一致，故鉴定为山柰酚-3-O-α-L-鼠里糖-(1→6)-β-D-葡萄糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷 ［kaempferol 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside］。

化合物7:黄色晶体，易溶于甲醇、二甲基亚砜。HR-ESI-MS m/z 771.2277［M+H］+，分子式C34H42O20，计算不饱和度为14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.49(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6')，6.91(1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，6.41(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.18(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.75(2H，d，J=7.4 Hz，H-1″，H-1″″)，4.24(1H，d，J=7.0 Hz，H-1‴)，3.86(3H，s，OCH3)，3.58(1H，m，H-6″a，)，3.55(1H，m，H-6″b)，3.39(1H，m，H-6‴)，0.74(3H，d，J=6.2 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，164.8(C-7)，161.1(C-5)，149.3(C-4')，146.8(C-3')，132.4(C-3)，121.4(C-6')，120.4(C-1')，115.2(C-5')，113.4(C-2')，105.0(C-10)，103.7(C-1‴)，100.7(C-1″″)，98.9(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，78.0(C-2″)，77.4(C-5″″)，76.9(C-5‴)，76.8(C-3‴)，76.5(C-5″)，69.9(C-4‴)，69.7(C-4″″)，76.9(C-3″″)，66.6(C-4″)，62.7(C-6″″)，60.9(C-6‴)，60.4(C-6″)，55.6(OCH3)。以上数据与文献［17］报道的基本一致，故鉴定为异鼠李素-3-O-(2-O-β-D-葡萄糖)-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷 ［isorhamnetin 3-O-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside-7-O-β-D-glucopyra noside］。

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