松弛素对TGF-β诱导的内皮细胞间质化的抑制作用

陈潇，周浩，周希，蔡洁洁，陈灵芝，郑高暑，黄伟剑，张怀勤

（1.温州医科大学附属第一医院 心内科，浙江 温州 325015；2.温州市中心医院 检验科，浙江温州 325000）

松弛素对TGF-β诱导的内皮细胞间质化的抑制作用

陈潇1，周浩1，周希1，蔡洁洁1，陈灵芝2，郑高暑1，黄伟剑1，张怀勤1

（1.温州医科大学附属第一医院 心内科，浙江 温州 325015；2.温州市中心医院 检验科，浙江温州 325000）

目的：探讨松弛素（RLX）对TGF-β诱导的内皮细胞间质化现象的影响。方法：采用体外分离的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）作为体外细胞模型，通过TGF-β10 ng/mL诱导内皮细胞间质化，100 ng/mL和200 ng/mL RLX分别预处理，再与TGF-β联合培养48 h。光镜下观察细胞形态学改变，CCK-8实验和transwell实验检测细胞增殖和迁移能力，免疫荧光单双染技术观察vimentin和CD31的表达变化，蛋白免疫印迹技术观察各实验组vimentin、CD31、ve-cadherin和α-SMA的蛋白表达。结果：阴性对照组内皮细胞呈铺路石样生长，TGF-β诱导组细胞形态向梭形转化，呈扩散迁移趋势。与阴性对照组相比，TGF-β诱导组细胞增殖、迁移能力明显增强；而RLX可抑制TGF-β诱导的增殖和迁移。免疫荧光单染结果显示，与阴性对照组相比，TGF-β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin明显上升；与TGF-β组相比，RLX联合TGF-β处理组CD31表达上调而vimentin表达下调。免疫荧光双染结果显示，阴性对照组以内皮性质的细胞为主，仅存在少量的CD31和vimentin双阳性细胞；TGF-β诱导组双阳性细胞明显增多；与TGF-β组相比，RLX联合TGF-β处理组间质效应的双阳性细胞下调，而内皮效应的双阳性细胞增多。蛋白免疫印迹结果显示，与阴性对照组……