复方丹参脉冲控释滴丸的制备及其体外释放度考察

（广东省深圳市福田人民医院，广东 深圳518033）

复方丹参是由丹参、三七和冰片3味中药组成的口服方，方中丹参为君药，三七为臣药，冰片为佐使药。丹参活血定痛，三七活血补气，冰片引经报使，三者相辅相成，具有活血化瘀、理气止痛的功效，临床上用于治疗胸中憋闷、心绞痛等症状，对心绞痛、冠心病等心血管疾病具有较好的疗效。心绞痛是心血管疾病中常见疾病，是由于冠状动脉供血不足，心肌急剧、暂时的缺血与缺氧所引起的临床综合征。心绞痛有明显的昼夜节律性，在凌晨发生的几率极高，可能与早晨血浆儿茶酚胺水平提高、皮质醇浓度达到高峰，使心肌氧供需平衡失调有关。因而，可设计在凌晨释药的制剂来防治心绞痛发生[1－3]。与复方丹参片等剂型相比，复方丹参滴丸具有疗效高、作用迅速、用量小、无胃肠道刺激等优点[4]。因此，本研究中拟用复方丹参为模型药，以滴丸为丸芯，通过包衣技术制备一种脉冲控释制剂，拟在22：00左右服药，时滞4～5h，药物在凌晨2：00左右开始释放并吸收入血，体内能达到有效血药浓度，并维持一定时间，以防止心绞痛的发生。

1 仪器与试剂

Aeromatic流化床包衣机（德国NIRO公司）；BS224S Sartorius型精密分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；Ultimate3000型高效液相色谱仪（美国戴安公司）；KQ－300VDE型双频数控超声波清洗器（昆山市舒美超声仪器有限公司）；ZRS－8G型智能溶出仪（天大天发科技有限公司）；DWJ－2000S－D型多功能滴丸试验机（烟台康达尔药业有限公司、烟台百药泰中药科技发展有限公司）。丹参、三七（购于广州清平药材市场，经鉴定为正品）；丹参素对照品（自制，含量99.4%）；聚乙二醇6000（PEG6000）、聚乙二醇4000（PEG4000）购自天津天泰精细化学品有限公司；液体石蜡（天津市化学试剂二厂）；低取代羟丙基纤维素（L－HPC，湖州展望化学药业有限公司）；羟丙基甲基纤维素（HPMC－E3，上海Colorcon辅料有限公司）；交联羧甲基纤维素钠（CMC－Na，日本旭化成工业株式会社）；交联聚维酮（PVPP，美国国际特品公司）；交联羧甲基淀粉钠（CCMS－Na，日本旭化成工业株式会社）；乙基纤维素水分散体（Surelease，上海Colorcon辅料有限公司）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 复方丹参滴丸制备

参照2005年版《中国药典（一部）》中方法提取[5]，取丹参450g，三七141g，冰片8g。丹参、三七加水煎煮，煎液滤过，滤液浓缩，加入乙醇，静置使沉淀，取上清液，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；冰片研细。取聚乙二醇4000和聚乙二醇6000的混合物适量，加热使熔融，加入上述稠膏和冰片细粉，混匀，选择合适的滴速、滴距，滴入冷却的液体石蜡中，制成合适大小的滴丸，即得复方丹参滴丸。

2.2 滴丸中丹参素含量测定

色谱条件：色谱柱为Dionex－Acclaim C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇－水(15:85，用冰醋酸调pH为3），流速1.0mL/min，检测波长280nm，进样量20μL。

测定方法：取包衣滴丸12粒，精密称定，研钵研碎，置25mL容量瓶中（用适量甲醇洗涤研钵，洗液并入容量瓶中），加甲醇至约15mL，超声处理10～15min，静置至室温，稀释至刻度，摇匀，以2000r/min的速度离心5min，取上清液，作为供试品溶液；精密称取丹参素钠对照品适量，按《中国药典》中方法制成对照品溶液。取上述溶液各20μL进样测定。

2.3 微丸释放度试验

采用2005年版《中国药典（二部）》附录ⅩC溶出度测定法第一法转篮法装置，按附录ⅩD释放度测定法第二法的操作方法，量取0.1mol/L盐酸溶液750mL，注入每个溶出杯中，加热使溶液温度保持在（37±0.5）℃，转速100r/min。称取适量包衣滴丸，放入转篮中，启动仪器并开始计时。分别于第1，2h时用注射器吸取释放液5mL，用0.45μm微孔滤膜过滤，同时补加盐酸溶液5mL，第2h取样完毕并补充完介质后，于杯内加入0.2mol/L磷酸钠溶液250mL，调节pH为6.8，然后于第3，4，6，8，10，12h时各取样5mL，用0.45μm微孔滤膜过滤，同时都分别补加相同pH的缓冲液5mL。取上述样品续滤液，注入高效液相色谱仪进行测定，计算累积释药百分率。

2.4 脉冲控释微丸制备

包衣液配制：将粘合剂HPMC－E3溶于水中，配成质量浓度为25g/L的溶液，加入CMC－Na或其他溶胀材料，使其质量浓度为35g/L，搅拌至均匀，静置过夜，使其充分溶胀，作为溶胀层包衣液。取Surelease，用水稀释成质量浓度为80g/L的溶液，搅拌均匀，即得控释层包衣液。

包衣微丸制备：将合适大小的滴芯置流化床中，从溶胀层到控释层依次包衣，出风温度为（37.0±2.0）℃，喷液速率为1.5～2.0mL/min，喷雾压力为0.16～0.20MPa，以底喷方式进行包衣。每次包衣后流化干燥10min，包衣完成后置烘箱中40℃固化12h即得包衣微丸。

2.5 处方与工艺因素对微丸释药的影响

溶胀层材料类型：保持控释层包衣增重20%，分别用CMCNa，L－HPC，PVPP作为溶胀层材料，均包衣增重12%，制备包衣滴丸，并分别进行释放度测定。结果3种材料的膨胀效果为CMC－Na＞L－HPC＞PVPP（图1）。CMC－Na膨胀效果明显优于其他两种材料，表明使用CMC－Na作为溶胀层材料滴丸可以达到预期的脉冲释药效果。

图1 溶胀层材料对药物释放的影响

溶胀层包衣增重：保持控释层包衣增重20%，以CMC－Na为溶胀层材料，改变溶胀层包衣增重分别为8%，10%，12%，15%，20%，制备包衣滴丸，并分别进行释放度测定。溶胀层增重对药物释放的影响结果见图2。结果当溶胀层包衣增重达12%时，膨胀层已能产生足够的膨胀力来撑破控释层衣膜，于4h时滞后开始释药，随后的3h累积释药达80%以上（图2）。说明溶胀层包衣增重达到一定的厚度时，才能获得较好的脉冲释放效果。因此本试验选用溶胀层包衣增重12%。

图2 溶胀层厚度对药物释放的影响

控释层包衣增重：以CMC－Na为溶胀层材料，并保持溶胀层包衣增重为12%，改变控释层包衣增重分别为10%，15%，20%，25%制备包衣滴丸，并分别进行释放度测定。控释层包衣增重对药物释放的影响见图3。结果表明，以CMC－Na为溶胀层材料，溶胀层包衣增重为12%时，控释层增重要合适，过薄则没有时滞，过厚则所产生的膨胀力无法撑破控释层衣膜，药物释放无法达到脉冲效果。

图3 控释层厚度对药物释放的影响

图4 3批包衣滴丸累积释药曲线

最佳工艺验证：根据以上工艺制备3批包衣滴丸，以CMC－Na为溶胀层材料，包衣增重为12%，控释层包衣增重至20%，体外试验表明平均时滞约为4h，之后3h累积释药均大于80%。结果见图4。

3 讨论

采用双层膜时控－崩解的方法制备控释微丸，溶胀层材料、厚度以及控释层厚度的选择是实现脉冲释药的关键。当控释层厚度一定，一定范围内随着溶胀层厚度的增加，释药时滞缩短，释药速率加快。当溶胀层厚度一定时，随着控释层厚度的增加，释药时滞明显延长，且时滞后释药速率也明显下降，甚至释药不完全。

滴丸剂是由药物和固体基质加热熔融成溶液、混悬液或乳液后，滴入不相混溶的冷凝液中，由于熔融液滴在冷凝液中的界面张力作用而收缩成丸，随后冷凝成固态而制得。是固体分散体的一种，由于滴丸剂具有其他剂型不具备的突出特色，符合人们对现代药物制剂的“三小”（用量小、毒性小、不良反应小），“三效”（高效、长效、速效）和方便用药、方便携带、方便贮存等基本要求[6－7]，故本研究选择滴丸作为丸芯进行包衣。

CMC－Na是优质崩解剂中的一种，具有很强的吸水膨胀性，崩解作用良好。以CMC－Na为内层溶胀材料在一定时滞之后药物的释放速率较快，能产生脉冲释药的效果，故以其作为内层溶胀层材料。

本研究中选择复方丹参滴丸为丸芯，以CMC－Na为溶胀层材料，Surelease作为控释层，制备复方丹参脉冲控释滴丸，当溶胀层增重12%，控释层增重20%，微丸体外释药时滞为4h，时滞后3h累积释药80%以上，达到预期效果。但该制剂的体内释药行为尚待进一步研究。

参考文献：

[1]周燕霞，李元波.复方丹参研究概况[J].江苏中医药，2007，39（7）：65.

[2]张玉祥，王金香.复方丹参胃漂浮缓释片的制备及其体外释放度研究[J].中国医药导报，2008，5（19）：34－35.

[3]刘 耀.单硝酸异山梨酯脉冲控释微丸的研究[D].重庆：第三军医大学，2007：8.

[4]李 军，王 茜.复方丹参滴丸治疗冠心病药理作用研究进展[J].山西中医，2001，17（5）：56－57.

[5]国家药典委员会.中国药典（二部）[M].北京：化学工业出版社，2005：528.

[6]王 巍，陈建明.滴丸剂的特点及其应用[J].药学实践杂志，2003，21（4）：201－203.

[7]王著宇.中药滴丸制剂优势分析[J].中国制药信息，2002，18（4）：20.