HPLC法测定益肾调经口服液中芍药苷的含量

陈 静

（河南省商丘市第一人民医院药剂科，商丘476000）

HPLC法测定益肾调经口服液中芍药苷的含量

陈 静

（河南省商丘市第一人民医院药剂科，商丘476000）

目的建立HPLC法测定益肾调经口服液中芍药苷含量的方法。方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）为流动相；流速1.0ml·min-1；检测波长230nm。结果芍药苷在0.5165～2.066μg范围内线性关系良好（r=0.9995），平均回收率为98.15%，RSD=0.91%（n=6）。结论本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于益肾调经口服液的质量控制。

芍药苷；高效液相色谱法；含量测定；益肾调经口服液

益肾调经口服液是由白芍、紫石英、柴胡、锁阳、枸杞子等药材加工制成的医院制剂，具有补肾疏肝，活血化瘀，调经之功效，用于调节垂体卵巢功能，促使卵泡发育，主要治疗月经不调，无排卵性不孕等［1］。现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效地控制药品质量。白芍为方中主药，芍药苷是白芍的主要有效成分［2］，本文以芍药苷为指标成分，建立了益肾调经口服液中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器Agilent 1260型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平，5210DT超声处理器。

1.2 试药芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-200934）；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。益肾调经口服液（由柘城县人民医院提供，批号：130112、130311、130611）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 ×150mm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）为流动相［3］；流速1.0ml·min-1；检测波长230nm；进样量10μl；理论板数应不低于2000。

2.2 线性关系考察取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样5、8、10、12、15、20μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程：Y=285.34X+106.33 r=0.9995。结果表明，芍药苷对照品浓度在0.5165～2.066μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。

2.3 对照品溶液的制备取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.4 供试品溶液及阴性对照溶液的制备精密量取本品约2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超声处理30分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺白芍的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。

2.5 干扰试验取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。

图1 高效液相色谱图

2.6 精密度试验取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，记录峰面积，RSD=0.97%（n=5），表明精密度良好。

2.7 稳定性试验取同一对照品溶液，分别在0、1、2、3、4、5、6h进样测定，RSD=0.88%，供试品溶液在6小时内峰面积基本稳定。

2.8 加样回收率试验精密量取6份已知含量为2.389mg／ml的样品0.5ml，置50ml量瓶中，分别精密加入浓度为0.1190mg／ml对照品溶液10ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（%）

2.9 样品测定取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样10μl，按外标法计算芍药苷的含量，结果见表2。

表2 3批样品中芍药苷的含量（n，%）

3 讨论

试验过程中，参考有关文献［3-4］，考察了不同提取溶媒对芍药苷提取率的影响，结果表明，芍药苷易溶于稀乙醇和甲醇，但甲醇毒性较大，故选用稀乙醇提取。比较了超声、回流等提取方法，结果显示超声提取简便、快速，提取完全。

［1］河南省食品药品监督管理局.河南省医疗机构制剂标准［S］.2004.

［2］国家药典委员会，中华人民共和国药典（一部）［S］.2010年版.北京：中国医药科技出版社，96-97.

［3］尹宁宁，徐华玲，徐丽华.白芍中芍药苷含量测定影响因素的实验研究［J］.中国医药导报，2009，6（11）：43-44.

［4］张琼英.高效液相色谱法测定健儿乐颗粒中芍药苷含量［J］.中国药业，2010，19（17）：23.

医书常见典故拾萃

理瀹：代指医药。《子华子·北宫意问》云：“子华子居北苓，北宫意公仲承侍，纵言而及于医。子华曰：‘医者理也，理者意也。药者瀹也，瀹者养也。’”以此命名者有，吴师机改《外治医说》为《理瀹骈文》，其自跋云：“《外治医说》刊既成，时贤皆云不甚解。其欲得吾之说者，则取其方而已。予知说之不行也，而要围垦遂弃。爰改名骈方，借《子华子》‘医者理也，药者瀹也’之句，摘理瀹二字以题其篇。”

珠尘：为传说中的仙药。晋·王嘉《拾遗记·虞舜》云：“（凭霄雀）常游丹海之际，时来苍梧之野，衔青砂珠，积成垄阜，名曰珠丘。其珠轻细，风吹如尘起，名曰珠尘……仙人方迴《游南岳七言赞》曰：珠尘圆洁轻且明，有道服者得长生。”此言“珠尘”为轻细如尘的青砂珠，为传说中的仙药，服之可以长生。以此为书名者为清代吴省三的《艺海珠尘》。

——国家中医药管理局网站

De t e r mina tio n o f Pae onif o rin in Yis h en Tiaojin g Or al Liq uid b y HPL C

Chen Jing(Pharmacy Department,Shangqiu First People's Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China)

ObjectiveTo establish a HPLC method of determination of paeoniforin in Yishen Tiaojing oral liquid.MethodThe chromatographic sxstem consisted of C18 column，used acetonitrile-0.1%phosphatesolution（14∶86）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 230nm，the flow rate was 1.0ml·min-1.ResultsThe paeoniforin have a good a linear relationship in the range of 0.5165～2.066μg（r= 0.9995），the average recoverx vas 98.15%and RSD=0.91%（n=6）.ConolusionThe established method is accurate，sensitive and simple.It can be used for qualitx control of Yishen Tiaojing oral liquid.

Paeoniforin；HPLC；Determination；Yishen Tiaojing oral liquid

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.104

：1672-2779（2014）-02-0154-02

��杨 杰 本文校对：刘晓云

2013-10-17）