白细胞介素18 基因启动子区-607C/A多态性与缺血性卒中的相关性

戴肖力，王占强(.河北省临城县人民医院内科，河北 邢台 054300；.河北省沧州市中心医院神经内五科，河北 沧州 06000)

·论著·

白细胞介素18 基因启动子区-607C/A多态性与缺血性卒中的相关性

戴肖力1，王占强2
(1.河北省临城县人民医院内科，河北 邢台 054300；2.河北省沧州市中心医院神经内五科，河北 沧州 061000)

目的探讨白细胞介素18(interleukin-18，IL-18)基因多态性与缺血性卒中之间的关联。方法利用病例-对照的研究方法，检测IL-18基因多态性位点-607C/A、-137G/C在病例组、对照组中的频率分布。结果病例组-607C/A位点的A等位基因型频率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。经条件Logistic回归校正后，病例组IL-18-607C/A位点A等位基因型频率仍明显高于对照组(OR=1.913，95%CI=1.621～2.375，P=0.034)。结论IL-18基因-607C/A位点的A等位基因型可能与河北汉族人群缺血性卒中之间具有一定的联系。

卒中；白细胞介素18；基因

白细胞介素18(interleukin 18，IL-18)是近年克隆鉴定的新型细胞因子，由活化的单核-巨噬细胞分泌，通过自分泌及旁分泌发挥介导炎症、调节机体免疫功能等重要作用。近年来国外研究发现IL-18基因上存在多个多态性位点，已被证实这种基因多态性在糖尿病肾病[1]、颅内动脉瘤[2]、动脉粥样硬化[3]、急性冠状动脉综合征[4]等缺血缺氧疾病发病过程中发挥重要的病理生理作用。但在缺血性卒中发病机制中的作用尚有争议。因此，本研究采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的方法，检测缺血性卒中患者IL-18基因启动子序列-607C/A、-137G/C位点基因型及其等位基因频率的分布，以期从分子遗传学角度探讨IL-18基因多态性与缺血性卒中的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2010年12月—2013年4月于河北省临城县人民医院神经内科、河北省沧州市中心医院神经内科住院的缺血性卒中患者371例为病例组，男性230例，女性141例，年龄41～74岁，平均(63.88±7.36)岁。全部患者符合国际疾病分类第9版的缺血性卒中诊断标准，并排除出血性脑血管病、血管炎性疾病所致脑梗死、血液病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、感染或正在服用激素治疗、肝肾功能不全及严重心功能不全、近期手术或创伤等。对照组选自同期健康体检者371例，男性247例，女性124例，年龄42～72岁，平均(62.87±7.57)岁。病例组和对照组均为彼此之间无血缘关系的河北汉族人群。2组性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法：依据国外相关文献[5]，选取与缺血性卒中可能具有密切相关性的编码基因-607C/A、-137G/C作为缺血性卒中易感性关联研究的候选基因，应用PCR-RFLP技术对这2个位点进行检测，应用Primer5.0软件进行引物设计。

1.3 H-W平衡检验：病例组和对照组的SNP位点基因型频率分布未偏离H-W平衡。故本研究所选人群基因型频率能够代表群体的基因分布。

1.4 统计学方法：应用SPSS13.0统计软件处理数据。采用χ2检验方法分析等位基因和基因型频率分布差异；采用OR的95%CI及P值评估基因多态性与缺血性卒中的相关性；应用Logistic回归分析排除危险因素的影响。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组基因和等位基因分布比较：病例组IL-18-607C/A位点CC、CA和AA基因型频率构成比明显高于对照组(P<0.05);病例组IL-18-607C/A位点A等位基因表达明显高于对照组，IL-18-607C/A位点的C等位基因表达明显低于对照组(P<0.05)。2组IL-18-137G/C位点GG、GC和CC基因型频率构成比以及L-18-137G/C位点的G等位基因和C等位基因差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2 Logistic回归分析：经条件Logistic回归分析，在排除高血压、糖尿病、高胆固醇血症和重度吸烟等传统危险因素影响后，病例组IL-18-607C/A位点A等位基因型频率仍明显高于对照组(OR=1.913，95%CI=1.621～2.375，P=0.034)。提示IL-18-607C/A位点A等位基因可能与缺血性卒中的风险有一定关系。见表2。

表1 病例组与对照组IL-18基因SNP位点基因型频率构成比和等位基因型频率分布比较 (n=371，例数，%)

表2 IL-18-607C/A位点条件Logistic回归分析结果

3 讨 论

IL-18是近年来发现的一种主要介导细胞免疫的多效性前炎症细胞因子，与IL-1α和IL-1β同为IL-1家族中第一超家族的成员。它主要由活化的单核巨噬细胞产生，属于单核因子，但在其他组织和细胞中也有广泛表达。IL-18可导血管内皮产生TNF-α、Fas配体、IL-1β及黏附分子等生物活性物质，这些物质直接参与动脉粥样硬化形成，而脑动脉粥样硬化是缺血性卒中的发病基础[6-7]。在IL-18基因启动子区域的-607C/A、-137G/C这2个基因启动子区域均存在C/A多态性，该启动子区的变异改变了IL-18基因的结构，最终使其产物IL-18的表达量增多，并通过IL-18对炎症反应的影响而改变缺血性卒中、高血压、冠心病等疾病的发生发展和转归[8-9]。

本研究结果显示病例组IL-18-607C/A位点A等位基因型频率明显高于对照组；随后，经Logestic回归分析，在排除高血压、糖尿病、高胆固醇血症和重度吸烟等传统危险因素后，病例组IL-18-607C/A位点A等位基因型频率仍然明显高于对照组。提示IL-18-607C/A位点可能与罹患缺血性卒中的风险有关，这些SNP位点可能会被用于检测缺血性卒中的遗传易感性。

[1] 陈军宁，尹友生，李小励，等.IL-18基因及血清IL-18水平与糖尿病肾病的相关性[J].山东医药,2009,49(37):7-9.

[2] 邱虹，李云超，陈广，等.白介素-18基因启动子区-607C/A多态性与颅内动脉瘤的发病和破裂的关系[J].中国全科医学，2012，15(9C)：3135-3138.

[3] GILL R,KEMP JA,SABIN C,et al.Human C-reactive protein increases cerebral infarct size after middle cerebral artery occlusion in adult rats[J].J Cereb Blood Flow Metab,2004,24(11):1214-1218.

[4] BARKER BR,TAXMAN DJ,TING JP.Cross-gegulation between the IL-1β/IL-18 processing inflammasome and other inflammatory cytokines[J].Curr Opin Immunol,2011,23(5):591-597.

[5] ZHANG N,YU JT,YU NN,et al.Interleukin-18 promoter polymorphisms and risk of ischemic stroke[J].Brain Res Bull，2010,81(6):590-594.

[6] FURUICHI K,WADA T,IWATA Y,et al.Interleukin-1-dependent sequential chemokine expression and inflammatory cell infiltration in ischemia-reperfusion injury[J].Crit Care Med,2006,34(9):2447-2455.

[7] ZHANG F,HU EC,GERZENSHTEIN J.The expression of proinflammatory cytokines in the rat muscle flap with ischemia-reperfusion injury[J].Ann Plast Surg,2005,54(3):313-317.

[8] DÉNIZ-NARANJO MC,MUOZ-FERNANDEZ C,ALEMANY-RODRGUEZ MJ,et al.Cytokin IL-1 beta but not IL-1 alpha promoter polymorphism is associated with Alzheimer disease in a population from the Cornary Islands,Spain[J].Eur J Neurol,2008,15(10):1080-1084.

[9] BANERJEE I,GUPTA V,AHMED T,et al.Inflammatory system gene polymorphism and the risk of stroke:a case-control study in an Indian population[J].Brain Res Bull,2008,75(1):158-165.

(本文编辑：许卓文)

2013-12-23；

2014-05-15

戴肖力(1972-)，男，河北临城人，河北省临城县人民医院主治医师，医学学士，从事缺血性脑卒中诊治研究。

R743.9

B

1007-3205(2014)06-0681-03

10.3969/j.issn.1007-3205.2014.06.020