尿路感染病原菌监测及耐药性分析

候素君，李建新，尹盟盟，程美娇

日照市中医医院检验科，山东日照2768000

尿路感染病原菌监测及耐药性分析

候素君，李建新，尹盟盟，程美娇

日照市中医医院检验科，山东日照2768000

目的探讨尿路感染常见病原菌分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法回顾分析2012年1月—2014年12月连续三年送检的中段尿标本中分离的1017株病原菌的分布及耐药性。应用美国BD-Phoenix 100全自动细菌分析仪及对应药敏板进行菌种鉴定及药敏试验，应用WHONET5.6软件进行耐药性统计分析。结果1017株病原菌中，革兰阳性球菌196株占19.27%，革兰阴性杆菌722株占70.99%，真菌99株占9.74%；排在前五位的细菌是大肠埃希氏菌、肠球菌、肺炎克雷伯氏菌、白色假丝酵母菌、凝固酶阴性葡萄球菌；革兰阳性球菌以粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、屎肠球菌为主，未发现万古霉素耐药株；革兰阴性杆菌以大肠埃希氏菌为主，对亚胺培南、美洛培南敏感率100%。结论尿路感染病原菌以肠杆菌和肠球菌为主，耐药性普遍提高，掌握医院内尿培养病原菌的分布及耐药性，可以指导临床合理选择抗菌药物。

尿路感染；病原菌；耐药性；抗菌药物

尿路感染是社区和院内常见的感染性疾病，在医院感染中仅次于呼吸道感染，居第2位[1-2]。随着抗菌药物、免疫抑制剂的广泛使用，以及各种侵入性操作的增多，细菌的耐药性日趋严重[3]。为了解该院尿路感染的病原菌分布、变迁及其耐药性，指导临床抗菌药物的合理应用，对2012年1月—2014年12月医院尿路感染病原菌的监测数据及病原菌耐药性进行分析，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

2012年1月—2014年12月医院门诊和住院患者送检的3491份清洁中段尿中分离的1017株病原菌，并剔除同一患者同一部位重复分离菌株。

1.2 方法

留取清洁中段尿，每份标本分别用无菌定量接种环接种10 uL于血平板、麦康凯平板，35℃培养18～48 h,获得纯培养后，细菌经革兰染色，挑取无污染且革兰阴性菌菌落计数≧105CFU/mL，革兰阳性菌菌落计数≧104 CFU/mL的细菌进行菌种鉴定和药敏试验，应用美国BD-Phoenix 100全自动细菌分析仪及对应药敏板进行分析，严格按仪器要求操作，药敏结果判断符合美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2010版的标准。

1.3 质控菌株

大肠埃希氏菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黄色葡萄球菌ATCC25923（购自山东省临床检验中心）和白色假丝酵母菌ATCC90028（青岛大学医学院附属医院赞助）。

1.4 统计分析

利用BD-Phoenix 100全自动细菌分析仪中的数据储存系统的统计软件进行统计；采用细菌耐药性监测网提供的WHONET5.6软件进行耐药性统计分析，计数资料用百分数表示。

2 结果

2.1 病原菌分布及构成比

2012—2014年自尿路感染患者中段尿标本中分离出病原菌1017株，革兰阳性球菌196株（19.27%）；革兰阴性杆菌722株（70.99%）；真菌99株（9.74%）；各病原菌株数逐年增高；排在前五位的病原一菌是大肠埃希氏菌、肠球菌、肺炎克雷伯氏菌、白色假丝酵母菌、凝固酶阴性葡萄球菌；分别占47.10%、11.01%、9.73%、5.02%、5.01%，见表1。

表1 2012—2014年尿培养病原菌分布及构成比[n（%）]

2.2 病原菌各科室分布及构成比

2012—2014年尿培养病原菌主要分布在风湿肾病科，占43.66%、脑病三科占11.70%、泌尿外科占10.82%、脑病二科占7.67%、内分泌科占5.01%、心二科占4.42%、脑病一科占3.44%、呼吸科占2.65%、感染科占1.08%、其他科占9.53%，见表2。

2.3 主要革兰阳性球菌对20种抗菌药物的耐药率

2012—2014年尿路感染患者分离的革兰阳性球菌中屎肠球菌和粪肠球菌对四环素、红霉素耐药率>90%,凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林耐药率100%，耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率77.6%；耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率17.6%；见表3。

2.4 主要革兰阴性杆菌对21种抗菌药物的耐药率

2012—2014年尿路感染患者分离的革兰阴性杆菌以大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌和奇异变形杆菌居多，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）产生率分别是52.8%（253/479）、42.4%（42/99）、27.9%（19/68），见表4。

表2 2012—2014年尿病感染患者尿培养病原菌各科室分布[n（%）]

3 讨论

泌尿系统感染是临床上常见的感染性疾病，三年来，该院3491份清洁中段尿中分离出病原菌1017株，主要分布在风湿肾病科占43.66%、脑病三科占11.70%、泌尿外科占10.82%、脑病二科占7.67%、内分泌科占5.01%、心二科占4.42%、脑病一科占3.44%、呼吸科占2.65%、感染科占1.08%，与上述科室住院老年患者较多免疫力低下，抗菌药物、免疫抑制剂的广泛使用，患有严重基础疾病，住院时间长，侵入性操作增多有关。病原菌以革兰阴性杆菌（70.99%）为主，以大肠埃希氏菌（47.10%）居多，与文献[4]报道接近；革兰阳性球菌(19.27%)中，粪肠球菌（6.98%）、凝固酶阴性葡萄球菌（5.01%）、屎肠球菌（4.03%）为主；真菌以白色假丝酵母菌（5.02%）和光滑假丝酵母菌（2.46%）为主，对氟康唑、两性霉素B均敏感，三代头孢菌素、碳青霉烯类药物等广谱抗菌药物长期、反复使用以及免疫抑制剂的广泛使用是引起真菌感染的重要因素[5]。

引起尿路感染的主要革兰阳性球菌是肠球菌属[6]和葡萄球菌属，肠球菌属中粪肠球菌最为常见，可能与大量运用广谱抗生素或者免疫力低下导致正常菌群紊乱，引起内源性感染有关；屎肠球菌的耐药率高于粪肠球菌，二者对红霉素、四环素耐药率>90%,对万古霉素、替考拉宁、吗啉恶酮耐药率<12%；对头孢菌素类、氨基糖苷类（除外高水平耐药筛选）、克林霉素、复方磺胺耐药率100%，临床治疗无效。屎肠球菌对氨苄西林、高浓度庆大霉素耐药率高，此种菌株采用庆大霉素联合氨苄西林无协同作用，建议对此类菌株引起的严重感染采用万古霉素治疗；该院虽未发现耐万古霉素肠球菌，但国内外均有报道，并且有上升的趋势，因此实验室应加强监测，及时发现，及时予以控制，合理使用抗生素。葡萄球菌属凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林耐药率100%；MRCNS（耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌）检出率77.6%，MRSA（耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌）检出率17.6%；凝固酶阴性葡萄球菌引起的医院感染也应引起重视，其中主要是表皮葡萄球菌，它定居在人体皮肤表面，易造成污染，应当综合临床和实验室的资料判定是否为污染，避免不必要地使用抗菌药物，尤其是万古霉素；对呋喃妥因、奎奴普丁/达夫普汀、吗啉恶酮、万古霉素、替考拉宁敏感性高,虽未发现万古霉素耐药株，但耐万古霉素的肠球菌可以通过质粒将耐药基因传递给葡萄球菌属，而且国外已经有多例关于耐万古霉素葡萄球菌的报道；万古霉素肾脏毒性较大，价格贵，并且是临床治疗革兰阳性球菌的最后一道防线，不宜作常规用药；而呋喃妥因在尿液中浓度高及对革兰阳性球菌的高敏感度，可作为临床治疗革兰阳性球菌引起尿路感染的首选药物。

表3 2012—2014年尿培养主要革兰阳性球菌对19种抗菌药物的耐药率（%）

表4 2012—2014年主要革兰阴性菌对22种抗菌药物的耐药率（%）

尿路感染的主要革兰阴性杆菌大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌易产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），ESBLs不仅能水解青霉素和头孢菌素，还能水解单酰胺类抗菌药物，建议临床选择含β-内酰胺酶抑制剂的复方抗菌药物和碳青霉烯类药物；ESBLs产生率分别是52.8%、42.4%，与该院近年来三代头孢菌素等β-内酰胺类药物的广泛使用有很大关系。大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌对亚胺培南、美洛培南敏感率100%，对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率<10%，但目前已出现耐亚胺培南的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌，应引起重视，而且上述药物抗菌谱广，极易导导致菌群失调而造成真菌二重感染，临床上应谨慎使用；对头孢唑林、氨苄西林、四环素耐药率>70%；大肠埃希氏菌对左氧氟沙星、环丙沙星（喹诺酮类）耐药率>55%,比文献报道略高，不能选作常规经验用药，这可能与几年前喹诺酮类药物常用于尿路感染所致，再加上最近几年很多养殖业把喹诺酮类药物常用于动物等因素有关；对呋喃妥因、阿米卡星耐药率<11%,阿米卡星对肾脏和听神经损害较大，不宜作为尿路感染常规用药；可首选呋喃妥因作经验治疗；产ESBLs菌株应首选碳青霉烯类药物。

奇异变形杆菌是尿路感染常见的致病菌之一，对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、氨曲南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率<20.0%，对其他抗菌药物耐药性相对高；铜绿假单胞菌常在治疗过程中，通过突变发生耐药，主要是微孔蛋白的突变,，阻止了抗生素由外膜进入胞质，对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率是30.7%，对其他抗菌药物耐药率均较高，所以临床医生应重视细菌培养，根据药敏结果选择用药，避免盲目根据经验治疗滥用抗生素。

尿路感染病原菌检出株数逐年增加，各临床医师应掌握本地区尿路感染病原菌分布及耐药性变迁，提高标本送检量；微生物室定期总结分析，指导临床合理使用抗菌药物，减缓细菌耐药的发生，对控制医院感染至关重要。

[1]郑建琼，杨年安，黄德斌.老年患者泌尿道感染病原菌分布及耐药分析[J].中华医院感染学杂志，2014（24）：6031-6032，6035.

[2]王世瑜，刘晓华，陈锦艳，等.尿培养病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2013，23（22）：5594-5596.

[3]龚德钒.尿路感染的病原菌分布及耐药性分析[J].中医临床研究，2014,6（24）：78-79.

[4]邓法文.泌尿系统感染病原菌分布及耐药性调查分析[J].中华医院感染学杂志，2012，2（17）：3890-3892.

[5]伊慧霞，苏娜，刘玉梅,等.临床念珠菌感染分布及耐药性分析[J].国际检验医学杂志，2014，35（21）：2997-2998.

[6]崔韶蕊.肠球菌的感染分布及耐药性分析[J].中国实用医药2014，9（26）：166-167.

Monitor and Drug Resistance of Pathogens From Urinary Tract Infection

HOU Su-jun，LI Jian-Xin，YIN Meng-meng,CHENG Mei-jiao
Rizhao city hospital of traditional Chinese medicine，Rizhao，Shandong Province，276800 China

ObjectiveTo investigate the distribution and drug resistance of the commonpathogens for urinary tract infections so as to provide basic evidence for reasonable clinical use of antibiotics.MethodsRetrospectively analyzed the distribution and drug resistance of 1017 pathogens isolated from midstream urine specimens from January 2012 to December 2014.US BD-Phoenix100 automatic bacteria analyzer and the corresponding drug sensitive plates were applied for strain identification and susceptibility testing.Then All datas were analyzed by WHONET5.6 software.ResultsA total of 1017 pathogens isolated from midstream urine included 196(19.27%)strains of gram-positive cocci,722(70.99%),strains of gram-negative bacilli,and 99(9.74%)strains of fungi;And ranked in the top 5 of pathogens isolated were Escherichia coli,Enterococci,Klebsiella pneumonlae,Candida albicans, and coagulase–negative Staphylococcus respectively.Enterococcus faecalis,coagulase–negative Staphylococcu and e.faecium were mainly in the gram-positive cocci and no strains resistant to vancomycin.we found.Escherichia coli were predominant pathogens in the gram-negative bacilli and the sensitivity to Imipenem and meropenem was 100%.ConlusionE.coli and Enterococci are the predominant pathogens of causing urinary tract infection along with a general increase in drug resistance.Therefore, it is of great significance to grasp the distribution and drug resistant of pathogens isolated from urine culture and it will contribute to guide the reasonable clinical use of antibiotics.

Urinary tract；Pathogenic bacteria；Drug resistance；Antibacterials

R378

A

1672-5654（2015）04（b）-0003-04

2015-01-13）

候素君（1974.1-），女，山东平度人，本科，主管检验技师，研究方向：临床微生物检验。