额尔齐斯河鱼类双身虫科一种属新记录

王 新焦 丽姚卫建郝翠兰岳 城

(1. 新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052; 2. 中国科学院水生生物研究所, 武汉 430072)

额尔齐斯河鱼类双身虫科一种属新记录

王 新1焦 丽1姚卫建2郝翠兰1岳 城1

(1. 新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052; 2. 中国科学院水生生物研究所, 武汉 430072)

研究报道了 2009年 4月至 2013年 5月采自新疆北部额尔齐斯河(中国段)东方欧鳊(Abramis brama orientalis Berg, 1949)鳃上的 1种双身虫科(Diplozoidae Palombi, 1949)、双身虫亚科(Diplozoinae Palombi, 1949)、双身虫属(Diplozoon Nordmann, 1832)的奇异双身虫(Diplozoon paradoxum Nordmann, 1832)。所获标本与 Nordmann (1832)的原始描述基本一致, 仅各部分度量等方面略有差异, 经比较鉴定, 为我国一新记录种。同时, 双身虫属在我国也尚属首次发现, 为我国一新记录属。研究对奇异双身虫的主要形态特征进行了描述并绘制了全图和特征图, 测定其ITS-2 rDNA序列并与GenBank同亚科虫种进行比对, 确定其与欧洲已发现的奇异双身虫相似度达到99.5%, 并对该寄生虫的地理分布特点进行了探讨。

额尔齐斯河; 东方欧鳊; 双身虫科; 双身虫属; 奇异双身虫; 属新记录; 种新纪录

额尔齐斯河(Ergis River)是我国唯一一条北冰洋水系的国际性河流, 其发源于中蒙边境, 地处亚欧大陆腹部。上游在我国境内, 从河源至中哈国界全长633 km, 流域面积5.73×104km2[1]。由于该河的发育形成、地理地貌特点以及下游水系的繁杂性,使得该河孕育着一些独特的鱼类, 如东方欧鳊(Abramis brama orientalis Berg, 1949)等[1]。2009年4月至2013年5月在对额尔齐斯河(中国段)鱼类寄生虫区系进行调查时, 在东方欧鳊鳃上采获 1种单殖吸虫, 经鉴定为铗钩虫目(Mazocraeidea Bychowsky, 1957)、双身虫科(Diplozoidae Palombi, 1949)、双身虫亚科(Diplozoinae Palombi, 1949)、双身虫属(Diplozoon Nordmann, 1832)的 奇 异 双 身 虫(Diplozoon paradoxum Nordmann, 1832)。据资料检索该属及该种均在我国未见报道[2—7]。在光学显微镜下对标本进行了观察测量并绘制了其全图和特征图, 其标本保存于新疆农业大学动物医学学院寄生虫标本室。测定奇异双身虫 ITS-2 rDNA序列并与GenBank同亚科虫种进行比对, 并对该寄生虫的地理分布特点进行了探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

于2009年4月至2013年4月先后7次在额尔齐斯河北屯、哈巴河县等地段购买或捕获东方欧鳊鱼样标本, 对其寄生的奇异双身虫进行调查研究。采集和解剖东方欧鳊373尾, 其中107尾感染奇异双身虫,共采集到奇异双身虫584条。对鱼样标本的鉴定, 以《中国额尔齐斯河鱼类资源及渔业》[1]为准。

1.2 方法

在得到鱼体样本后, 首先对鱼体样本进行编号,将鱼体端放于解剖盘中, 照相、测量尾叉长及体高并做好记录。将鱼体两侧鳃完整的取出放在培养皿里, 首先仔细观察鳃上有无肉眼可见的寄生虫, 因双身虫个体较大, 可以先肉眼观察一下有无虫体,而后分别将每片鳃置于解剖镜和显微镜下检查, 挑取虫体, 分别用75%、95%酒精固定。具体的采集步骤参照《鱼病调查手册》[8]进行。双身虫标本的制片流程如下: 经75%酒精固定后的虫体首先复水,苏木素染色, 系列酒精脱水, 酸酒精脱色, 高浓度酒精脱水, 二甲苯透明, 中性树胶封片、最后晾干,

2 结果

2.1 奇异双身虫形态学鉴定结果

奇异双身虫, 新记录 Diplozoon paradoxum Nordmann, 1832 (图1、图2)

宿主与寄生部位: 东方欧鳊 Abramis brama orientalis Berg, 1949, 鳃丝。

采集地点及时间: 额尔齐斯河(中国段), 2009年4月至2010年1月。

形态特征(依据12个封片标本描述): 大型虫体, 呈 X形, 由两条虫体在幼年时永久性结合而成(图1A)。全长1.92—10.08 μm, 虫体分为体前部、生殖结合区和体后部 3部分。体前部长 1.32—6.44 μm, 宽0.45—2.70 μm, 体后部长0.63—3.13 μm。体后部的前半段腹面有4—8对明显的侧褶, 多数为6对。口吸盘(图1B)直径0.07—0.19 μm。咽(图1C)明显,直径0.06—0.13 μm。卵巢(图1D) 1枚, 椭圆形, 位于生殖结合区与体后部连接处或后方。睾丸1枚, 分3—5叶, 位于卵巢之后或与卵巢并行。生殖孔开口于生殖结合区的侧面。成虫在生殖结合区和固着盘之间, 有一肌肉质、腹面凹背面凸、近圆形盘状的增宽区。肠在体前部形成许多彼此不相连接的侧分支, 呈网状分布, 行至生殖结合区侧支减少或无,延长至盘状增宽区又向两侧分出 5—12对侧支, 终止于固着盘前部。卵黄腺(图1E)发达, 呈斑块状, 密布体前部和生殖结合区。固着盘腹面附着有四对固着铗(图1F)和一对中央钩(图1G)。固着铗大小为: 第1对(0.06—0.12) μm×(0.08—0.19) μm, 第2对(0.05—0.12) μm×(0.11—0.23) μm, 第 3对(0.05—0.13) μm× (0.13—0.26) μm, 第 4对(0.06—0.14) μm×(0.13—0.26) μm。四对固着铗从大到小依次为: 4＞3＞2＞1,有的虫体第4对和第3对几乎等大。固着铗中间薄片前面半片稍宽, 上无任何颗粒, 前弓和后弓均无粗纹。中央钩钩柄长 0.058—0.071 μm, 钩尖长0.028—0.033 μm。虫卵(图1-H)具极丝, 在相对的一侧无辅突, 大小(0.32—0.43) μm ×(0.08—0.12) μm。

图1 奇异双身虫(新记录种)Fig. 1 Diplozoon paradoxum (Nordmann, 1832)

图2 奇异双身虫Fig. 2 Diplozoon paradoxum (Nordmann, 1832)

2.2 ITS-2 rDNA PCR扩增及测序结果

本实验所扩增的额尔齐斯河东方欧鳊奇异双身虫样品的ITS-2 rDNA序列长度为774 bp(包括正反向引物所在的5.8 S和18 S的部分序列)。将本实验所测额尔齐斯河东方欧鳊奇异双身虫 ITS-2 rDNA序列与GenBank中奇异双身虫ITS-2 rDNA序列进行同源性分析, 结果表明其同源性为 99.5% (771/774), 碱基缺失率为 0.5%(3/774)。比对结果证明二者为同一虫种, 经资料检索奇异双身虫为中国一新记录种。

3 讨论

采用Khotenovsky(1985)的分类系统, 双身虫亚科(Diplozoinae Palombi, 1949)共分5属, 双身虫属(Diplozoon Nordmann, 1832)为淡水鱼类寄生单殖吸虫, 该属自1832年建属以来, 在我国尚未发现[3]。此次采集并描述的虫种与Nordmann(1832)采自前苏联的模式标本在形态方面一致, 仅各部位量度略有差异[9]。主要特征为: 生殖孔开口于生殖结合区; 口吸盘前无腺体; 成虫在生殖结合区和固着盘之间有一肌肉质、腹面凹背面凸、近圆形盘状的增宽区; 体后部的前端腹面有4—8对明显的侧褶; 睾丸分3—5 叶; 肠在体后部的盘状增宽区向两侧分出十余对侧支。这些形态特征与资料描述一致, 完全符合铗钩虫目(Mazocraeidea Bychowsky, 1957)、双身虫科(Diplozoidae Palombi, 1949)、双身虫亚科(Diplozoinae Palombi, 1949)、双身虫属(Diplozoon Nordmann, 1832)、奇异双身虫(Diplozoon paradoxum Nordmann, 1832)的形态特点, 故奇异双身虫为我国鱼类寄生虫一种新记录, 双身虫属为我国双身虫亚科一属新记录。双身虫属包括2个遍及欧洲动物区系的物种, 另一种为D. scardinii Komarova, 1966, 该种与奇异双身虫不同之处在于其体后部前端腹面的侧褶为8—13对, 且中央钩钩尖长0.022—0.025, 此次调查中未见此种。

迄今为止, 双身虫亚科在世界范围已报道约70 种, 其中有31种分布或仅分布于我国, 归属于4属。各虫种比例如下: 拟双身虫属(Paradiplozoon Achmerov, 1974) 70.97%、华双身虫属(Sindiplozoon Khotenovsky, 1981) 19.35%、前侧孔吸虫属(Inustiatus Khotenovsky, 1978)6.45%、真双身虫属(Eudiplozoon Khotenovsky, 1985)3.23%[3]。早在19世纪早期, Nordmann 就在东方欧鳊鳃丝上发现奇异双身虫, 双身虫属(Diplozoon Nordmann, 1832)主要是欧洲的种类, 西亚也有其分布, 然而在我国南北主要水系一直未见分布[7]。但姜乃澄(1989)推测: 我国新疆西北有可能存在, 因为再往西的前苏联境内就有其分布[10]。额尔齐斯河发源于新疆北部的阿尔泰山脉, 向西流经哈萨克斯坦, 又转折北上流入俄罗斯境内, 汇入鄂毕河, 最终流入北冰洋[1]。而东方欧鳊(Abramis brama orientalis Berg)属鲤形目(Cypriniformes)、鲤科(Cyprinidae)、欧鳊属(Abramis), 原分布于里海和咸海水域, 于1959—1964年被前苏联移植入额尔齐斯河下游的斋桑泊, 20世纪60年代后扩散至我国境内的上游, 并逐渐形成捕捞产量[1]。东方欧鳊的历史分布和奇异双身虫基本一致, 这应该是因宿主迁移造成的, 在一定条件下北冰洋水系鱼类所携带的寄生虫有在上游出现的可能性, 在某种程度上造成了额河(中国段)鱼类寄生虫区系组成与国内其他水域鱼类寄生虫组成方面的差异。因此我国境内的上游区段与西伯利亚分区的中、下游有共同的鱼类组成和寄生虫种类就不足为奇。双身虫属种新记录的发现将对额河鱼类区划提供更有力的证据,同时这也将为进一步研究寄主之间、寄生虫与宿主之间的亲缘关系、地理演变、生态格局等方面提供新的科学依据。

一般认为, 大多数双身虫具有较高的宿主特异性, 甚至有些具有严格的宿主特异性(一种寄生虫只寄生一种宿主), 因此宿主特异性在寄生虫的种类鉴定中有着独特的重要地位[3]。对该河近30种鱼类进行调查后发现, 奇异双身虫在额尔齐斯河(中国段)仅寄生于东方欧鳊, 但在欧洲的波罗的海、黑海、里海、咸海等水域的河流和湖泊中, 还发现其寄生于上口欧鳊、湖拟鲤(Rutilus rutilus lacustris Pallas, 1811)、江鳕(Lota lota Linnaeus, 1758)、河鲈(Perca fluviatilis Linnaeus, 1758)等鱼类的鳃上。

对奇异双身虫ITS-2 rDNA序列进行了测定, 结果显示, 本研究所测序列与GenBank中欧洲已发现的奇异双身虫进行比对, 结果与法国(AF369759)同源性达到99.5% (771/774), 碱基缺失率为0.5% (3/774);与捷克(AJ563372)同源性达到99.5% (766/769), 碱基缺失率为0.5% (3/769), 与两种均仅有3个碱基对存在差异, 证明其为同一物种。

双身虫的寄生对宿主的生长发育有一定影响,其个体大, 从鳃上夺取的营养多; 大量寄生会导致鳃黏液增多, 污物黏着, 本次调查的最高寄生强度达到21条, 对宿主的呼吸有一定影响。东方欧鳊是一种品质优良的广温性鱼类, 其适应性强, 抗寒性强, 食性广, 个体大, 生长快, 易自繁自生, 特别适合在我国西北地区鱼类区系较简单的大型水库、湖泊中移植驯化[11]。目前, 东方欧鳊人工驯化已成功,并成为额尔齐斯河产量最高的经济鱼类之一, 同时也被我国渔业工作者移植到阿勒泰地区各湖泊水库和我区其他河流, 产量可观, 极有开发推广的前景。在开发东方欧鳊的过程中, 寄生虫的调查和研究工作意义重大, 特别是在新疆额尔齐斯河流域这样一个连接亚欧大陆, 具独特地理位置区域的地方更具有理论上的意义, 同时在进行人工养殖过程中指导病害的防治等方面具有现实的经济价值及意义。

致谢:

感谢中国科学院水生生物研究所王桂堂研究员,吴山功博士在资料收集方面给予的大力帮助。

参考文献：

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THE FIRST RECORD OF A NEWLY REPORTED CHINESE DIPLOZOIDAE OF MONOGENEA ON FISHES IN THE ERGIS RIVER

WANG Xin1, JIAO Li1, YAO Wei-Jian2, HAO Cui-Lan1and YUE Cheng1
(1. College of Veterinary Medicine, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China; 2. Institute of Hydrobiology, Chinese Acadeny of Sciences, Wuhan 430072, China)

Diplozoon paradoxum (Nordmann, 1832) belongs to Platyhelminthes, Monogenea, Diplozoinae, Diplozoon. In this study, we reported this organism collected from the gills of Abramis brama orientalis (Berg, 1949) in the Ergis River (within China) from April 2009 to May 2013. Most of the morphological features of this newly found insect were the same as the original description of Diplozoon paradoxum (Nordmann, 1832), except for a few minor differences in the measurements. The genus, Diplozoon Nordmann, was reported for the first time in China. Here we described the morphological characteristics of this insect and showed the images. We analyzed its ITS2 rDNA sequence and compared the results with the parasite from the same subfamily in the GeneBank. The similarity between the newly found Chinese Diplozoon paradoxum and the European Diplozoon paradoxum was 99.5%. The distribution of Diplozoon paradoxum was also discussed in this paper.

Ergis River; Abramis brama orientalis Berg; Diplozoidae; Diplozoon; Diplozoon paradoxum Nordmann; Genus new record; Species new record

Q959.15

A

1000-3207(2015)04-0794-04

2014-08-08;

2015-04-20

国家自然科学基金项目(No.: 31160535); 淡水生态与生物技术国家重点实验室开放性课题(No.: 2011FB06)资助

王新(1991—), 女, 陕西商洛人; 农学学士; 研究方向为预防兽医学。E-mail: wangxin19910705@sina.com

岳城(1958—), 男, E-mail: yuechengxnd@aliyun.com保存于新疆农业大学寄生虫实验室。具体的寄生虫制片方法按《鱼病调查手册》[8]进行。虫体的鉴定依据相关参考文献[3, 9, 10]进行, 全部测量工作在显微镜下完成并绘制其全图和结构特征图(量度单位以mm计)。采集得到的标本, 固定或制片后保存于新疆农业大学动物医学学院。实验所用引物由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司合成。

10.7541/2015.104