陈 丽,李万奎
近年来,心脑血管疾病的发病率逐年上升,已成为致残及病死的重要原因。动脉粥样硬化是多种心脑血管疾病的重要病理基础,而内皮细胞损伤被认为是促使动脉粥样硬化的早期关键环节[1]。在内皮细胞众多损伤因素中,氧化应激损伤是一个重要因素,参与了内皮细胞损伤病理变化过程的各个环节。丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)等是反映氧自由基水平及生物体清除氧自由基能力的主要观察指标[2]。依达拉奉是临床上唯一广泛使用且效果优越的新型自由基清除剂,其清除自由基的确切效果多有报道[3]。本研究旨在细胞水平上观察依达拉奉对过氧化氢(H2O2)致人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的影响,探讨其对血管内皮细胞氧化应激损伤保护作用,为其临床用药提供进一步的实验资料。
1.1 药物 依达拉奉标准品:中国药品生物制品检定所;过氧化氢溶液(H2O2,30%):无锡市苏强化工有限公司。
1.2 试剂 M199培养基:GIBCO公司;胰蛋白酶:GIBCO公司;胎牛血清:杭州四季青生物工程材料有限公司;总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒:南京建成生物工程研究所;丙二醛(MDA)试剂盒:南京建成生物工程研究所;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒:南京建成生物工程研究所。
1.3 实验对象 脐带数根,来自解放军第154医院妇产科。
1.4 实验方法
1.4.1 HUVEC的培养、传代及鉴定 依据文献方法[4],从健康足月产妇脐静脉内提取HUVEC,经Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学鉴定证实培养的细胞为内皮细胞。……