甘露消毒丹对四氯化碳所致急性肝损伤大鼠的影响

魏小果

甘肃省人民医院消化科，甘肃 兰州 730000

甘露消毒丹对四氯化碳所致急性肝损伤大鼠的影响

魏小果

甘肃省人民医院消化科，甘肃 兰州 730000

目的：探讨甘露消毒丹对CCL4所致急性肝损伤的治疗效果及作用机制。方法：将SD大鼠50只随机分为正常组和药物组（低、中、高剂量组），每组10只；选用甘露消毒丹对CCL4所致湿热型急性肝损伤大鼠模型进行干预，检测生化、免疫、病理、细胞通路等指标。结果：造模后48h模型组大鼠ALT、AST、TB含量明显升高，与正常组相比差异有统计学意义（P＜0.05）；药物各组与模型组比较，ALT、AST、TB降低，其差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：甘露消毒丹具有一定的保肝降酶作用，能显著改善急性肝损伤大鼠肝组织的病理变化，减轻肝细胞病变程度。

急性肝损伤；甘露消毒丹；四氯化碳

甘露消毒丹是解毒的经典验方，有关其对急性肝损伤的疗效虽有一定研究，但多数局限于临床症状的改善，动物模型研究较少。本研究通过大鼠湿热模型的建立，探讨甘露消毒丹对四氯化碳所致急性肝损伤的治疗效果及作用机制。为保肝药物的筛选提供新的研究思路。

1 材料与方法

1.1 分组 S D大鼠50只，雌雄各半，体质量160～200 g，实验室动物许可证号S C X K（甘）2004-007，分笼喂养，以D P S软件（D P S V.8.01版）生成随机序列号，称重，按随机序列号分组，以苦味酸钠标记，分为正常组（A组）、模型组（B组）、甘露消毒丹低剂量药物组（C组）、甘露消毒丹中剂量药物组（D组）、甘露消毒丹高剂量药物组（E组），每组10只。

1.2 动物模型的建立及给药 参照文献[1-2]方法，每只大鼠尾静脉注射B C G l m g（含1.0×106个活菌/m g)，第11天后由尾静脉注射LP S30μg／k g制作免疫模型[3]。

先将甘露消毒丹（按《温热经纬》卷五配伍组成及比例）免煎剂配成每1m L含生药2.5 g的溶液（原液），按照大鼠每公斤体质量1 g、5 g、25 g分别计算低、中、高剂量药物组每只大鼠所需原液

量，再以0.9%N S配成总量为2.5m L的溶液灌胃，造模当天开始给药，每日1次。正常组与模型组给予等量生理盐水灌胃。

1.3 标本采集和处理 24 h后处死大鼠，股动脉取血，沿腹正中线剖腹，取肝脏组织，去肝脏筋膜，并用肉眼观察大鼠肝脏的外形、体积、颜色、质地等情况，留取肝组织标本，部分制备肝匀浆，部分以4%多聚甲醛(含0.1%D EPC)固定，作光镜观察。1.4 观察指标及检测方法 多聚甲醛处理48 h后，股动脉采血，肝素抗凝管接血，以3 000 r p m速度离心10分钟，取血清200μL，全自动生化仪采用连续检测法测定A L T、A S T、T B含量。

1.5 统计学方法 数据采用S P SS 19.0统计软件包进行分析，计量资料以(±s)表示，多组均数比较采用方差分析，检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 对血浆ALT、AST、TB的影响 模型组血清A L T、A S T较正常组明显升高，T BI L较正常组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，甘露消毒丹低、中、高剂量给药组均可显著抑制A L T、A S T、T BI L活力的升高（P＜0.01），表明甘露消毒丹免煎剂可改善B C G/LP S所致大鼠急性肝损伤，见表1。

表1 各组大鼠血清转氨酶的变化情况(±s,n=10）

表1 各组大鼠血清转氨酶的变化情况(±s,n=10）

注：与正常对照组比较，▲▲表示P＜0.01，与模型组比较，**表示P＜0.01。

组别A组B组C组D组E组TBIL/（μmol·L-1）0.37±0.31 8.87±5.84▲▲0.59±0.50**0.65±0.48**0.75±0.40**剂量/（g·kg-1）--1 5 2 5用药天数/d 11 11 11 11 11 ALT/（U·L-1）70.43±8.44 702.83±571.28▲▲49.33±5.78**55.33±8.85**54.86±20.57**AST/（U·L-1）301.57±66.22 2119.5±1015.27▲▲188.5±39.21**234.83±35.54**235.86±55.11**

2.2 对血浆SOD、MDA的影响 与正常对照组比较，模型组动物肝脏中MDA含量明显增高，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型组比较，药物各组MDA含量均有降低，差异有统计学意义（P＜0.05），且以药物组高剂量组降低最为明显；药物组各组S OD活性比较无明显差异，见表2。

表2 各组血浆中MDA含量和SOD活性比较(±s,n=10）

表2 各组血浆中MDA含量和SOD活性比较(±s,n=10）

注：与正常对照组比较，▲表示P＜0.05，△表示P＞0.05；与模型组比较，■表示P＜0.05，□表示P＞0.05。

组别A组B组C组D组E组剂量/（g·kg-1）SOD(NU/mgprot) 149.29±17.64 135.77±19.49△136.4±23.47□120.41±6.30□131.16±15.73□--1 5 2 5用药天数/d 11 11 11 11 11 MDA(nmol/mgprot) 127.1±34.90 156.6±16.11▲105.7±20.19■106.8±32.44■97.94±12.08■

3 讨论

A L T主要存在于肝细胞浆中，A S T存在于肝细胞胞浆和线粒体中，肝细胞膜通透性增加或破损，胞浆内A L T、A S T释放入血，使血清中A L T、A S T升高；血清A L T水平的高低可灵敏反映肝细胞变性、坏死的程度[4]。本研究显示模型组血清A L T、A S T、T BI L含量与正常组相比明显增高(P＜0.01），表明造模成功。甘露消毒丹免煎剂低、中、高剂量组对四氯化碳损伤大鼠的A L T、A S T、T BI L均有明显改善作用(P＜0.01），由此推断不同剂量的甘露消毒丹免煎剂对肝细胞膜的损伤、肝细胞变性或坏死有一定的抑制作用。MDA是脂质过氧化的最终产物，可破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、坏死，其含量高低可反映氧化损伤程度，低、中、高剂药物组均能降低肝损伤大鼠血清MDA含量(P＜0.05)，可能与甘露消毒丹能够降低MDA含量，保护肝细胞膜性结构，从而改善肝细胞能量代谢有关。S OD是氧自由基的清除剂，可抑制自由基启动的脂质过氧化反应，肝细胞受到自由基攻击时，S OD可因其过度消耗而减少。本研究中模型组血清S OD含量与正常组相比有所降低，药物组血清S OD含量的变化不明显，原因有待进一步探讨。而甘露消毒丹免煎剂低、中、高剂量治疗组组间各指标差异均无统计学意义（P＞0.05），无明显的量效关系，也无法通过转氨酶及氧化学指标评判哪组疗效更好[5]。

综上所述，甘露消毒丹免煎剂能够减轻肝损伤，有保护肝细胞的作用。其作用机制可能与减少脂质过氧化有关，但对S OD的影响并不显著。

此实验中仍然存在不完善不成熟的地方，样本量较小，又为普通级大鼠，大鼠之间的异质性较大，对药物的反应性的个体差异较大，因而使数据间的离散度较大，影响了最终统计结果，使得数据有下降的趋势但无统计学差异。

[1] 连粤湘，龙晓英，吴婉芬，等.双草退黄冲剂1号治疗急性黄疽型肝炎深度黄疸的临床与实验研究[J].中国中西医结合杂志，2001,21(9)：649-651.

[2] 孙玉芹,高天芸,周娟，等.川芎嗪对小鼠急性肝损伤性脂肪肝保护作用的研究[J].中国临床药理学与治疗学，2007，12 (5)：540-543.

[3] 谢春英.溪黄草提取物预防大鼠急性肝损伤的实验研究[J].中药材，2007，30（12）：1582-1583.

[4] 顾立，李万平，黄爱萍.护肝解毒冲剂对大鼠急性肝损伤的保护作用[J].泸州医学院学报2008；31（6）：523-625.

[5] 吴泽明，孙晖，吕海涛，等.代谢物组学研究进展及其在中医药研究中的应用展望[J].世界科学技术：中医药现代化，2007，9（2）:99-103.

Influenceof GanLu XiaoDu Pelleton Ratsw ith Phenoxin-induced Acute Liver Injury

WEIXiaoguo
Gastroenterology Departmentof Gansu Provincial Hospital,Lanzhou 730000,China

Objective:To explore therapeutic effectsof GanLu XiaoDu pelleton CCL4-induced acute liver injury and itsmechanism of liver protection.Methods:Fifty SD ratswere random ly allocated to the normal group and the herbalgroups(low,moderate and high dosagesgroups),ten ratseach group;ratw ith acute liver injury of heatdampness pattern were intervened w ith GanLu XiaoDu pellet to detect the indexesof biochem istry,immune,pathology and cellular pathway.Results:In 48 hours after establishing themodels,the contents of ALT,AST and TB in rats of the modelgroup increased notably,the differencehad statisticalmeaning comparedw ith the normalgroup(P＜0.05);The comparisons among the herbalgroups and themodelgroup showed that the contents of ALT,AST and TB decreased, the difference indicated statisticalmeaning(P＜0.05).Conclusion:GanLu XiaoDu pelletpossesses the functions of protecting liver and lowering transaminase to a certain degree;it could improve pathological changes of liver tissue notably and abate liver injury of the ratesw ith acute liver injury.

acute liver injury;GanLu XiaoDu pellet;phenoxin

R285

A

1004-6852(2015)07-0017-03

2014-10-25

魏小果（1973—），女，副主任医师。研究方向：消化系统疾病的诊治。