HPLC同时测定复方藤乌软膏中6种乌头类生物碱含量

李美艳 赫清雪 王爱武

摘要：目的 建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定复方藤乌软膏中6种乌头类生物碱含量的方法。方法 色谱柱为Agilent XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相A为乙腈-四氢呋喃（25∶8），B为0.1 mol/L醋酸铵溶液（每1000 mL加冰醋酸0.5 mL），梯度洗脱；流速：1 mL/min；检测波长：235 nm；柱温：25 ℃。结果 乌头碱在0.072～0.648 μg具有良好的线性关系（r=0.999 5），平均回收率为99.29%，RSD=1.25%；新乌头碱在0.062～0.648 μg具有良好的线性关系（r=0.999 5），平均回收率为99.12%，RSD=0.85%；次乌头碱在0.064～0.384 μg具有良好的线性关系（r=0.999 8），平均回收率为99.57%，RSD=1.07%；苯甲酰乌头原碱在0.056～0.672 μg具有良好的线性关系（r=0.999 2），平均回收率为98.11%，RSD=0.61%；苯甲酰新乌头原碱在0.055～0.993 μg具有良好的线性关系（r=0.999 9），平均回收率为99.27%，RSD=1.10%；苯甲酰次乌头原碱在0.078～0.702 μg具有良好的线性关系（r=0.999 8），平均回收率为99.08%，RSD=1.38%。结论 本方法操作简便、灵敏度高、重复性好，结果准确，可作为复方藤乌软膏中乌头类生物碱的含量测定方法。

关键词：复方藤乌软膏；乌头碱；新乌头碱；次乌头碱；苯甲酰乌头原碱；苯甲酰新乌头原碱；苯甲酰次乌头原碱；高效液相色谱法

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.09.024

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）09-0087-04

Simultaneous Determination of 6 Aconitum Alkaloids in Compound Tengwu Ointment by HPLC LI Mei-yan1，2， HE Qing-xue1，2， WANG Ai-wu1 （1.Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University， Jinan 250021， China；2.Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Jinan 250355， China）

Abstract：Objective To establish an HPLC method for the simultaneous determination of the 6 aconitum alkaloids in compound Tengwu Ointment. Methods Chromatographic column was Aglient XDB-C18 column （4.6 mm × 250 mm， 5 μm）， with the mobile phase A of acetonitrile- tetrahydrofuran （25∶8）， phase B was 0.1 mol/L ammonium acetate solution （0.5 mL acetic acid added to the 1000 mL） with gradient elution；the flow rate was 1 mL/min；the detection wavelength was set at 235 nm；the column temperature was 25 ℃. Results Aconitine was in the good linear range of 0.072-0.648 μg （r=0.999 5）， with the average recovery of 99.29%， RSD=1.25%. Mesaconitine was in the good linear range of 0.062-0.648 μg （r=0.999 5）， with the average recovery of 99.12%， RSD=0.85%. Hypaconitine was in the good linear range of 0.064-0.384 μg （r=0.999 8）， with the average recovery of 99.57%， RSD=1.07%. Benzoylaconine was in the good linear range of 0.056-0.672 μg （r=0.999 2）， with the average recovery of 98.11%， RSD=0.61%. Benzoylmesaconine was in the good linear range of 0.055-0.993 μg （r=0.999 9）， with the average recovery of 99.27%， RSD=1.10%. Benzoylhypaconine was in the good linear range of 0.078-0.702 μg （r=0.999 8）， with the average recovery of 99.08%， RSD=1.38%. Conclusion This method is simple， sensitive， repeatable and accurate， which can be used for determination of aconitum alkaloids in compound Tengwu Ointment.

Key words：compound Tengwu Ointment；aconitine；mesaconition；hypaconitine；benzoylaconine；benzoylmesaconine；benzoylhypaconine；HPLC

復方藤乌软膏是山东大学附属省立医院骨伤科专家与药学人员遵循中医药理论共同研制的传统中药制剂，由鸡血藤、生川乌、生草乌、自然铜等组成，具有消肿止痛、续筋接骨等功效，主要用于治疗运动劳损、急性扭伤、挫伤、闪伤及轻度骨折引起的疼痛，临床应用30余年疗效较好。

复方藤乌软膏中的生川乌、生草乌含有乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱等乌头类生物碱，既是毒性成分又是有效成分[1]。……