硫酸铵在蛋白质含量测定中的参比作用初探

王亚棋 黎隽 刘立科等

【摘要】目的 中国药典2010版附录Ⅶ D 氮测定法第二法，是蛋白质含量测定的经典方法。但参考蛋白难于获得，检测结果缺乏参比性。本文尝试以分析纯硫酸铵为参考品，检测关节软骨再生支架样品中的蛋白质含量。方法 分别称取三份硫酸铵，与蛋白样品一起，在相同条件下测试其回收率，用以参照评价蛋白样品的检测结果。结果 硫酸铵的回收率接近100%，不考虑消化样品的差异，可以确认样品测定结果。 结论 在没有标准蛋白作参比的情况下，在凯氏定氮法中引入硫酸铵，可以很好的监测实验结果。

【关键词】蛋白质；测定；硫酸铵

【中图分类号】R151.2 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）03-0011-01

蛋白质是由氨基酸以酰胺键（ 肽键） 相结合形成的结构极其复杂的高分子化合物， 是生物体中的主要含氮物质。蛋白质与细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质转运和遗传等密切相关， 蛋白质的定量测定是生物化学和其他生物科学、食品检验、临床检验、疾病诊断和质量检验中最重要的工作。蛋白质测定方法一般可分为间接方法和直接方法。间接方法是通过测定样品中蛋白质的含氮量进行推算蛋白质含量的方法。直接方法则是根据蛋白质的物理和化学性质， 直接测定蛋白质含量的方法。多年来， 利用蛋白质的主要性质（ 如含氮量、肽键、折射率等） 和利用蛋白质含有的特定氨基酸残基（ 如芳香基、酸性基、碱性基等） ， 测定蛋白质的方法不断发展， 主要有凯氏定氮法（ 国际经典测定方法） 、分光光度法、电化学法、滴定法、高压液相色谱法、电泳法、免疫法等[1]。……