雷帕霉素对肝脏缺血再灌注中线粒体DNA聚合酶γ的调控作用

张莹 余曦

(1.贵州省人民医院肝胆外科；2.贵州省人民医院急诊外科，贵州 贵州 550002)

雷帕霉素对肝脏缺血再灌注中线粒体DNA聚合酶γ的调控作用

张莹1余曦2

(1.贵州省人民医院肝胆外科；2.贵州省人民医院急诊外科，贵州 贵州 550002)

目的 研究大鼠肝缺血再灌注损伤中mtDNA聚合酶γ的表达情况，以及雷帕霉素对其的调控作用。方法 SD大鼠60只，制作大鼠肝脏缺血再灌注模型，分四组:A组：肝脏缺血30 min无干预组；B组：缺血50 min无干预组；C组：缺血50 min雷帕霉素干预组；D组：假手术组。分别于术后24 h、第3天、第5天处死各组大鼠，取肝组织进行病理检测；采用RT-PCR检测mtDNA聚合酶γ mRNA的表达。结果 C组肝组织病理损害和mtDNA聚合酶γ mRNA表达明显低于B组(P<0.01)，术后A组、B组mtDNA聚合酶γ mRNA的表达逐渐降低，C组则一直维持在同一水平。结论 雷帕霉素能够减轻肝脏缺血再灌注损伤，抑制HIRI中mtDNA聚合酶γ mRNA的过度表达，从而对肝脏缺血再灌注损伤起保护作用。

大鼠； 肝脏； 缺血再灌注损伤； 线粒体DNA聚合酶γ； 雷帕霉素

肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injur,HIRI)是临床上肝脏外科常见的病理生理过程，如何减轻HIRI对肝细胞的损伤，保护肝功能，防止肝衰竭一直是国内外研究者十分关注的课题[1]。现有研究[2]已表明，HIRI过程中存在mtDNA损伤，在线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)损伤修复机制中，线粒体DNA聚合酶γ(mitochondrial DNA polymerase γ，mtDNA pol γ)是位于线粒体内唯一的DNA聚合酶，对mtDNA的复制、合成、修复有着重要作用。我们通过建立大鼠HIRI模型，并给予雷帕霉素干预，了解在肝脏缺血再灌注中修复肝脏损伤时mtDNA pol γ的表达情况，并探讨雷帕霉素对HIRI中mtDNA polγ的调控作用 。

1 材料与方法

1.1 材料 由第三军医大学实验动物中心提供SPF级雄性SD大鼠(n=60)，体质量200～250g，术前12 h禁食，自由饮水。以灭菌药用蓖麻油配制浓度为0.345 mg/mL的雷帕霉素溶液用于灌胃。总RNA提取及cDNA合成试剂盒由北京天根生物有限公司提供。……