粪便钙卫蛋白对儿童溃疡性结肠炎诊断和治疗的指导作用

秦臻，吴成，陈苗苗

(安徽省儿童医院，合肥 230000)



粪便钙卫蛋白对儿童溃疡性结肠炎诊断和治疗的指导作用

秦臻，吴成，陈苗苗

(安徽省儿童医院，合肥 230000)

摘要：目的探讨粪便钙卫蛋白对儿童溃疡性结肠炎(UC)诊断及治疗的指导作用。方法选取UC患儿57例(UC组)，单纯腹泻患儿30例(腹泻组)，健康儿童60例(健康对照组)。留取粪便，采用ELISA法检测钙卫蛋白。UC组采用“升阶梯”方案(美沙拉嗪无效时加用激素，继而加用单克隆抗体)治疗，比较治疗前后粪便钙卫蛋白变化，分析钙卫蛋白诊断UC的效能及其与治疗的关系。结果UC组、腹泻组、健康对照组中位粪便钙卫蛋白分别为307.93、124.95和19.17 μg/g，UC组明显高于腹泻组和健康对照组(P均<0.01)，腹泻组与健康对照组比较无统计学差异(P>0.05)；UC组活动期、缓解期患儿中位粪便钙卫蛋白分别为333.53、273.50 μg/g，P<0.05；ROC曲线分析显示粪便钙卫蛋白升高的临界值为175.53 μg/g，对应诊断UC的最佳灵敏度和特异度分别为77.2%和87.9%。UC组治疗后活动期患儿中位粪便钙卫蛋白明显下降；中位粪便钙卫蛋白≥307.93 μg/g者激素使用率、用药时间长于<307.93 μg/g者(P均<0.05)。结论粪便钙卫蛋白诊断儿童UC准确、无创、安全，有助于临床选择治疗药物及判断治疗效果。

关键词：粪便钙卫蛋白；儿童；溃疡性结肠炎；诊断

溃疡性结肠炎(UC)是一种与免疫、炎症、遗传、环境多种因素相关的炎症性肠病， 20~40岁为高发人群。儿童虽不是UC的高发人群，但是多项研究证实，UC发病年龄越早、患儿预后越差，癌变几率越高，且治疗效果不佳[1~7]。肠镜检查为UC的主要诊断手段，但其为有创检查，操作难度大，部分患儿家长拒绝接受，导致儿童UC确诊困难。钙卫蛋白是一种来源于中性粒细胞和巨噬细胞的含钙蛋白，具有极强的稳定性，其作为炎症反应标记物主要用于评估机体炎症反应程度。本研究探讨粪便钙卫蛋白对儿童UC诊断及治疗的指导作用。

1资料与方法

1.1临床资料研究对象为2011年5月~2014年12月我院收治的UC患儿57例(UC组)，其中男33例、女24例，年龄8~14(10.4±1.5)岁，均符合我国炎症性肠病诊治规范的共识意见[4]；活动期32例、缓解期25例。排除标准：①合并其他消化系统器质性疾病者；②合并严重肝肾功能不全者；③近期服用非甾体类抗炎药物者。采取UC“升阶梯”方案治疗，即美沙拉嗪无效时加用激素，继而加用单克隆抗体；疗程8~24周。选取同期因腹泻就诊而肠镜未见明显病变的患儿30例(腹泻组)男17例，女13例，年龄9~14(10.8±1.7)岁；健康儿童60例作为健康对照组，男30例，女30例，年龄6~13(10.5±1.6)岁。三组性别、年龄具有可比性。

1.2粪便钙卫蛋白检测三组均留取粪便标本5~10 g，2 h内送至医院，置于-20 ℃冰箱保存。按照粪便重量(1 g)：萃取液容积(49 mL)的比例加入萃取液，充分震荡混匀后提取混悬液2 mL，高速离心10 min后再次提取上清液1 mL，置于-20 ℃冰箱待检。上述操作于标本留取后72 h内完成。 采用ELISA法检测粪便钙卫蛋白，试剂盒购自北京海瑞翔天生物制剂有限公司，酶标仪设置为405 nm进行吸光度(A) 测定。标准液包括7个浓度，最高浓度标准液的A值为1.2～1.5。计算标准曲线和标本钙卫蛋白浓度。分析粪便钙卫蛋白诊断UC的效能，UC组治疗前后粪便钙卫蛋白及其与治疗的关系。

1.3统计学方法采用SPSS15.0统计软件。不符合正态分布的计量资料以中位数(四分位数间距)表示，采取Kruskal-Wallis秩和检验，两两比较采取SNK-q检验，计数资料比较采取χ2检验。钙卫蛋白的诊断价值由ROC曲线完成。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1三组粪便钙卫蛋白水平比较UC组、腹泻组、健康对照组中位粪便钙卫蛋白分别为307.93 μg/g(183.3 μg/g，458.58 μg/g)、124.95 μg/g(86.81 μg/g，303.75 μg/g)和19.17 μg/g(14.17 μg/g，29.88 μg/g)，UC组明显高于腹泻组和健康对照组(P均<0.01)，而腹泻组与健康对照组比较无统计学差异(P>0.05)。32例活动期患儿钙卫蛋白为333.53 μg/g(245.04 μg/g，507.58 μg/g)，缓解期患儿为273.50 μg/g(113.16 μg/g，374.53 μg/g)，活动期明显高于缓解期(Z=-2.332，P=0.02)。

2.2粪便钙卫蛋白诊断UC的效能以UC为准划定ROC曲线，结果显示，曲线下面积(AUC)为0.895(0.845，0.945)，位于0.7~0.9之间，认为粪便钙卫蛋白诊断UC达到“准确”的标准(P<0.01)。选取曲线中youden指数(灵敏度+特异度-1)对应的点作为粪便钙卫蛋白升高的临界值，结果显示，粪便钙卫蛋白升高的临界值为175.53 μg/g，对应诊断UC的最佳灵敏度和特异度分别为77.2%和87.9%。见图1。

图1　粪便钙卫蛋白诊断UC的ROC曲线

2.3UC组治疗前后粪便钙卫蛋白变化及其与治疗的关系治疗后UC组活动期患儿粪便钙卫蛋白降至256.87 μg/g(135.04 μg/g，429.86 μg/g)，明显低于治疗前(P<0.05)，与缓解期患儿比较无明显差异(P>0.05)；活动期患儿粪便钙卫蛋白≥307.93 μg/g与<307.93 μg/g者激素使用率分别为75.86%、50.00%，用药时间分别为(13.8±1.2)、(8.6±0.9)周；二者比较，P均<0.05。

3讨论

钙卫蛋白是来源于中性粒细胞和巨噬细胞的主要蛋白质，由两条重链14和一条轻链8非共价结合形成的异二聚体，具有较强的抗热性和抗蛋白酶活性，不被细菌和溶菌酶分解，体外存在时间长，稳定性强，是急性炎症活化的良好标记物[8]。肠黏膜炎症变化时大量中性粒细胞聚集，故检测中性粒细胞相关蛋白有助于确定诊断。

国内外研究显示，粪便钙卫蛋白和肠黏膜钙卫蛋白表达呈正相关性，两者在UC患者中明显升高[9~12]。但上述研究均集中在成人UC患者，且粪便钙卫蛋白对UC治疗的指导价值尚未得知。本研究结果显示，UC患儿中位粪便钙卫蛋白明显高于腹泻组和健康对照组，与国内外相关研究的报道差异不大，粪便钙卫蛋白升高考虑与UC肠黏膜中性粒细胞聚集有关，进一步证实UC患者高炎症反应的特点。本研究AUC为0.895(0.845，0.945)，证实粪便钙卫蛋白诊断UC较为准确。

当前国内外普遍认同UC“升阶梯”治疗方案，即抗炎药物作为基础治疗，无效时加用激素，当激素耐药或无效时再加用单克隆抗体类药物。本研究结果显示，UC组活动期患儿给予美沙拉嗪、激素等药物治疗后，钙卫蛋白明显下降，与缓解期患儿无明显差异，说明治疗后肠道内炎症病变程度下降，总体趋于好转。但是57例UC患儿的治疗方案并不相同，用药时间也有差异。我们发现，粪便钙卫蛋白≥307.93 μg/g的UC患儿激素使用率高，使用时间长，提示粪便钙卫蛋白≥307.93 μg/g者治疗难度较大，单用美沙拉秦常无法获得满意疗效，临床对此类患儿应及早使用激素甚至单克隆抗体，并延长治疗时间，以确保疗效。

总之，粪便钙卫蛋白是一种无创、安全的检测方法，具有无创、可重复测定等优点，对于诊断儿童UC有一定准确性，也可用于指导治疗。

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(收稿日期：2015-07-12)

中图分类号：R574.62；R446.6

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)04-0059-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.04.022