胃癌组织中CD133和ALDH1表达变化及意义

李新新，李贵新，黄琰，傅玲，栾可峰，王文浩

(1 潍坊医学院，山东潍坊261000；2潍坊医学院附属医院)



胃癌组织中CD133和ALDH1表达变化及意义

李新新1，李贵新2，黄琰2，傅玲2，栾可峰1，王文浩2

(1 潍坊医学院，山东潍坊261000；2潍坊医学院附属医院)

摘要：目的观察胃癌组织中肿瘤干细胞标志物CD133和乙醛脱氢酶1(ALDH1)的表达变化，并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测117例原发胃癌患者胃癌组织及癌旁组织中的CD133和ALDH1，并分析其与临床病理参数、预后的关系。结果CD133、ALDH1在胃癌组织中阳性表达率分别为33.33%、49.57%，癌旁组织均阴性，P均<0.01。CD133表达与胃癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)，ALDH1表达与胃癌浸润深度、组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。CD133、ALDH1阳性表达者5年生存率均高于阴性者(P均<0.05)。Cox回归多因素分析显示，CD133、ALDH1阳性表达是影响患者生存的独立预后因素。结论胃癌组织中CD133、ALDH1表达增高，在胃癌发生、发展及及预后中起重要作用。

关键词：胃癌；肿瘤干细胞；CD133蛋白；乙醛脱氢酶1

我国是胃癌高发国家，胃癌处于恶性肿瘤死亡原因的第3位。肿瘤干细胞(CSCs)可能是具有成瘤能力的肿瘤起始细胞，CD133与ALDH1是其筛选及鉴定的标志物[1～8]，但在胃癌中的研究相对较少。2007年5月～2015年6月，我们观察了胃癌组织中CD133、ALDH1的表达变化，并探讨其临床意义。

1材料与方法

1.1临床资料收集2007年5月～2009年5月在潍坊医学院附属医院行胃癌根治术并有完整临床资料的117例初治患者，术前均未行任何抗肿瘤治疗。其中男58例，女59例；年龄31～80岁，平均53.4岁；经病理确诊均为腺癌;组织分化程度：高分化40例，中分化39例，低分化38例；临床分期：Ⅰ期31例，Ⅱ期28例，Ⅲ期27例，Ⅳ期31例；肿瘤直径≤5 cm 52例，>5 cm 65例；有淋巴结转移77例。随访时间截止2015年5月，随访时间5～71个月，平均31.97个月。每例手术标本离体后5 min内切取癌灶中心非坏死部分及距癌灶5 cm 外正常胃组织，置于甲醛液中固定,石蜡包埋切片。

1.2CD133与ALDH1检测方法采用免疫组化法，按试剂盒说明书操作。CD133、ALDH1单克隆抗体分别购自Milrenyi Biotec与Epitomics公司，抗体修复液购自康为世纪公司，免疫组化试剂盒购自Dako公司。CD133主要表达于细胞膜上，ALDH1主要表达于细胞质内，阳性表现均为棕褐色、棕黄色或浅黄色着色。在每张组织片中随机选取4个高倍视野，每个视野观察500个细胞，计数阳性细胞率，≥10%为阳性表达[9]。

1.3统计学方法采用SPSS17.0统计软件。计数资料用χ2检验，相关性采用Spearman相关分析，生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验，采用Cox回归模型进行预后因素分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1胃癌及癌旁组织中CD133与ALDH1表达比较CD133、ALDH1在胃癌组织阳性表达率分别为33.33%(39/117)、49.57%(58/117)，癌旁组织均阴性表达，P均<0.01。

2.2CD133、ALDH1表达与胃癌临床病理参数的关系见表1。

2.3胃癌组织中CD133与ALDH1表达的关系胃癌组织中CD133、ALDH1表达无相关性(r=0.133，P=0.153)。

2.4CD133、ALDH1与生存预后的关系胃癌5年生存率CD133、ALDH1阳性者分别为2.56%、17.24%，均低于阴性者的41.03%、38.98%，P均<0.05；Cox回归多因素分析显示，CD133(RR=0.407，P=0.012)及ALDH1(RR=0.422,P=0.024)的表达是影响胃癌患者生存的独立预后因素。

表1　CD133、ALDH1表达与胃癌临床病理病理因素的关系

3讨论

CSCs与肿瘤的耐药、复发、转移存在着密切关系[10]，几乎所有实体瘤中均存在CSCs[11,12]。CD133是一个具有5次跨膜结构的单链糖蛋白，可能是一种通过酪氨酸残基磷酸化作用而发挥级联效应的生长因子受体。Ishigami 等[13]发现，胃癌干细胞高表达CD133，且胃癌组织浸润深度及淋巴结转移与CD133表达有关。ALDH1是主要存在于细胞质中的一种催化细胞内乙醛氧化为乙酸的酶，参与正常组织和肿瘤组织的基因表达，是细胞分裂增殖及分化的必需物质。Levi等[14]研究发现，ALDH1在造血和神经系统的干细胞中高表达，可作为表面标志物对CSCs进行分选。

本研结果显示，胃癌组织中CD133、ALDH1高表达,而癌旁正常组织中则均为阴性表达，这对胃癌的诊断具有推动作用。同时，胃癌组织中CD133阳性表达率越高，组织分化程度越低、临床分期越高，越易发生淋巴结转移；ALDH1阳性表达率越高，肿瘤浸润越深、组织分化程度越低、临床分期越高、越易发生淋巴结转移，肿瘤的恶性程度越高。并且，CD133、ALDH1阳性表达者生存率低、预后差，以此我们可以评估患者的远期生存状况。但我们并未发现 CD133与ALDH1在胃癌组织中的阳性表达存在关系，但两者仍可独立作为胃癌CSCs的标志物，为胃癌发病机制及诊疗的研究奠定基础。

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(收稿日期：2015-08-24)

中图分类号：R735.2

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)10-0042-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.017

通信作者：李贵新(E-mail： liguixin@wfmc.edu.cn)

基金项目：潍坊医学院附属医院科技创新基金资助项目(K11TS1105)。