辣椒素对大细胞肺癌NCI—H460细胞凋亡线粒体的影响

任公平 李华洋 王书惠 佟雷

摘要：目的 观察辣椒素对人大细胞肺癌NCI-H460细胞线粒体膜电位（Δψm）的影响，探讨其诱导NCI-H460细胞凋亡的线粒体机制。方法 体外培养NCI-H460细胞，采用不同终浓度辣椒素进行处理，以不加辣椒素为对照。MTT法检测NCI-H460细胞增殖反应，计算半数抑制率；分别采用流式细胞术AnnexinV-FITC/PI法、JC-1活细胞染色、免疫荧光和Western blot检测细胞凋亡、ψm、细胞色素C（Cyt c）的分布和线粒体内Cyt c的表达。结果 与对照组比较，辣椒素明显抑制NCI-H460细胞增殖，并诱导NCI-H460细胞凋亡（P<0.05，P<0.01）；辣椒素显著降低NCI-H460细胞Δψm、促进Cyt c由线粒体释放至胞浆及降低线粒体内Cyt c的表达（P<0.05）。结论 辣椒素对肺癌NCI-H460细胞增殖具有抑制作用，诱导其凋亡，其机制可能是通过线粒体介导的细胞凋亡途径实现。

关键词：辣椒素；非小细胞肺癌；凋亡；线粒体膜电位；细胞色素C

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.018

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）08-0069-05

肺癌是目前最常见的恶性肿瘤，也是发病率和病死率最高的恶性肿瘤。辣椒素是香草酰胺类生物碱，又名辣椒碱，是辣椒属植物红辣椒的活性成分。有研究表明，辣椒素可抑制肝纤维化和诱导食管鳞状细胞癌细胞凋亡[1-2]，辣椒素可通过多种途径在体外发挥抗癌作用，如诱导人结肠癌HCT116细胞和

胰腺癌BxPC-3细胞凋亡[3-4]，抑制小细胞肺癌细胞H69和H82增殖[5]。本研究前期实验表明，辣椒素可降低人大细胞肺癌NCI-H460细胞侵袭能力，同时应用Hoechst33342核染色分析也证实，辣椒素可诱导NCI-H460细胞凋亡[6]。为进一步探讨辣椒素诱导NCI-H460细胞凋亡的可能机制，本实验观察辣椒素对NCI-H460细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential，Δψm）的影响，探讨其诱导NCI-H460细胞凋亡的线粒体机制。

1 实验材料

1.1 细胞株

人大细胞肺癌NCI-H460细胞，中国科学院上海细胞库。

1.2 药物及配制

辣椒素（纯度>99%，美国Sigma公司），溶解于二甲基亚砜（DMSO），配制成储备液，-20 ℃冰箱保存，临用时以完全培养液稀释到所需浓度。……