左归丸、右归丸对去卵巢骨质疏松大鼠神经肽CGRP、SP、VIP、NPY的影响

杨锋 杨利学 李小群 李彦民

陕西中医药大学附属医院，陕西 咸阳 712000

神经系统调控骨的发育、修复的研究日益增多，业已证实神经肽降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide，CGRP)、P 物质(substance P， SP)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide，VIP)、神经肽Y (neuropeptide Y，NPY)与其受体构成神经肽网络介导了神经系统与骨组织间信号的传导，影响着骨的各种代谢变化，但它们与绝经后骨质疏松症(osteoporosis,OP)关系以及补肾中药调控机制的相关研究仍较少。左、右归丸均出自《景岳全书》，是补肾阴和补肾阳的代表方剂。左归丸由六味地黄丸化裁而成，去“三泻”(泽泻，茯苓，丹皮),加入枸杞、龟板胶、牛膝加强滋补肾阴之力；又加入鹿角胶、菟丝子温润之品补阳益阴，阳中求阴。右归丸是将左归丸去掉部分滋阴药龟板胶和牛膝，再增加几种辛温补阳药附子、杜仲、肉桂、当归而成。即张介宾所谓：“善补阴者，必于阳中求阴，则阴得阳升而泉源不竭。善补阳者，必于阴中求阳，则阳得阴助而生化无穷”之义。中医在“肾主骨”理论指导下应用左、右归丸治疗骨质疏松症取得了较好的疗效。本文拟采用去卵巢方法诱导OP，分别观察雌激素缺乏状态下模型OP 大鼠骨组织及骨髓间充质干细胞中神经肽CGRP、SP、VIP、NPY及它们受体的分布与表达变化，并观察左、右归丸对神经肽的干预作用，进一步阐明补肾中药复方的整体调节机理。

1 材料和方法

1.1 材料

选择SPF级SD大鼠60只，雌性8月龄，体重200±20 g,购自西安交通大学动物实验中心(陕动质2013492)。DMEM(L) (Gibco,invitrogen,USA)、胎牛血清(FBS, Gibco, invitrogen, USA)、Total RNA 提取试剂盒(Promega)、RT-PCR Kit (invitrogen, USA)、mRNA引物(华大基因)、胰蛋白酶(Gibco,USA)、CO2孵箱(thermo, USA)

1.2 方法

1.2.1实验动物的分组：动物称重后随机分组，将60 只大鼠随机分为4 组，假手术组，模型组，左归丸组、右归丸组，每组15只。……