杨 洋 王子佳 李慧玉 张瑞萍
(1.林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学),黑龙江 哈尔滨 150040 2.黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江 哈尔滨 150086)
白桦BpMADS12基因启动子的克隆及表达分析
杨洋1王子佳1李慧玉1张瑞萍2
(1.林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学),黑龙江 哈尔滨 150040 2.黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江 哈尔滨 150086)
为探究白桦BpMADS12基因的功能,克隆了BpMADS12基因上游1 750 bp启动子序列,通过生物信息学对顺式作用元件进行分析,并利用农杆菌花序浸染法将其遗传转化入拟南芥,然后通过β-葡萄糖苷酸酶(GUS)组织化学染色检测BpMADS12启动子的组织表达特性及干旱胁迫应答。结果表明:BpMADS12启动子序列中含有与开花、激素及干旱响应等相关的顺式作用元件;该启动子在拟南芥中的表达模式呈现为在营养生长阶段不表达,而进入生殖生长阶段后,在根、花叶、花瓣、雄蕊、雌蕊及种子等各个组织部位中均表达;PEG胁迫后处理组拟南芥中GUS表达量低于未处理组。研究显示BpMADS12基因参与白桦的开花调节、激素应答、胁迫响应(干旱)等生物学过程,对生殖生长阶段各组织器官的发育有一定的调控作用,且负调控干旱响应途径。
白桦;BpMADS12启动子;顺式作用元件;克隆;表达分析
MADS-box转录因子是生物界普遍存在的一类转录因子家族,该家族分为2大类,第1类包含动物和真菌中的ARG80/SRF-like基因及植物中的M型MADS-box基因,第2类包含动物和真菌中的MEF2-like基因及植物中的MIKC-type基因。植物中典型的由MADS-box基因编码的转录因子含有高度保守的MADS结构域,它包括1个半保守的I-结构域、1个相对保守的K-结构域和1个C-结构域[1]。……