Spink8基因对EC9706细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响*

孙　艳，张　华，封青川，范玉佳，李　涛，张玉超，贺　颖，郑　红#

1)郑州大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系 郑州 450001　2)河南省中医药大学第一附属医院生殖医学科 郑州 450003　3)郑州市妇幼保健院优生科 郑州 450012



Spink8基因对EC9706细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响*

孙艳1，2)，张华3)，封青川1)，范玉佳1)，李涛1)，张玉超1)，贺颖1)，郑红1)#

1)郑州大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系 郑州 4500012)河南省中医药大学第一附属医院生殖医学科 郑州 4500033)郑州市妇幼保健院优生科 郑州 450012

Spink8基因；食管癌细胞；增殖；凋亡；细胞迁移

目的：探讨Spink8基因对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法：利用DNA重组技术构建Spink8真核表达重组质粒并转染EC9706细胞，构建稳定表达Spink8的EC9706细胞。取未转染、转染空质粒和稳定表达Spink8的EC9706细胞，采用RT-PCR和Western blot 法检测Spink8 mRNA和蛋白，MTT法检测细胞增殖，Annexin V-APC/7-AAD法检测细胞凋亡，并进行Transwell细胞迁移实验。结果：与未转染和转染空质粒组细胞比较，稳定表达Spink8的EC9706细胞增殖受到抑制(P<0.05)，增殖抑制率为24.5%；细胞凋亡率增加(P<0.05)； Transwell小室穿膜细胞数减少(P<0.05)。结论：Spink8可能是一个新的抑癌基因。

食管癌是上消化道中最具有侵略性的恶性肿瘤之一，但其确切的发病机制仍未阐明。Li等[1]运用全基因组阵列分析技术并借助生物信息学筛选可能对食管癌具有重要致病作用的基因和通路，研究结果提示丝氨酸蛋白酶Kazal型抑制剂8(serine protease inhibitor kazal type 8，Spink8)在食管癌组织中表达下调，提示Spink8可能是一个新的抑癌基因，在食管癌的发生发展中起着重要的作用。作者对Spink8基因对人食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡及迁移能力的影响进行了探讨。

1　材料与方法

1.1主要试剂EC9706由郑州大学基……