不同产地泽泻盐炙前后水提液中成分及其利尿作用分析

陈中文（肇庆市端州区华佗医院药剂科　肇庆　526040）

不同产地泽泻盐炙前后水提液中成分及其利尿作用分析

陈中文（肇庆市端州区华佗医院药剂科肇庆526040）

目的：探讨不同产地泽泻盐炙前后水提液中成分及其利尿作用的差异。方法：抽选福建、江西、四川、广西四个地方的泽泻为研究材料，使用薄层色谱法定性实验以及高效液相色谱法定量试验分析上述产地的泽泻在盐炙前后水提液成分的差异。同时本次研究以SD系列大鼠为研究对象，将其随机分为4组使用不同产地的泽泻生品、炙品对大鼠进行代谢笼法实验，测定大鼠尿量变化差异。结果：相较于空白对照组，同一时间广西生品给药后1～3h、6h可促使大鼠排尿量明显增加（P＜0.05），而四川生品只是在给药之后的1h促使大鼠排尿量增加，江西生品对大鼠排尿量没有明显的影响（P＞0.05），福建生品给药1～2h后可促使大鼠排尿量明显减少（P＜0.05）。广西泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量增加，四川泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量明显增加，而江西与福建泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量明显减少（P＜0.05）。结论：不同产地的泽泻生品均无长时间的利尿效果，但不同产地的泽泻盐炙品则具有不同的利尿效果。

不同产地 HPLC泽泻 盐炙 水提液 利尿作用

泽泻是一种常年生长在水中或者沼泽中的草本植物，味甘、淡且性寒，需要注意的是，泽泻全株有毒且以地下块茎毒性最为严重，但其同时也能用来治疗肾炎水肿、肠炎泄泻、小便不利等临床症状，而不同的泽泻制法在临床效果、主治症状上有所不同［1］。临床研究显示［2］，泽泻生品、酒炙泽泻、麸炒泽泻均具有不同程度的利尿作用，但盐炙泽泻的利尿作用未经证实。本次研究将探讨不同产地泽泻盐炙前后水提液中成分及其利尿作用的差异，现报道如下：

1　材料与方法

1.1仪器和试药：材料：泽泻（产地：福建、江西、四川、广西，批号分别为006009、007004、008005、006003。通过广西中医学院药用植物教研室鉴定为泽泻科植物泽泻的干燥块茎）。呋塞米片（上海朝晖药业有限公司，批号：国药准字H31021074，规格：20mg×100s）。

仪器：薄层层析硅胶G（青岛海洋化工有限公司，化学纯，批号000727）、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、乙腈（均为分析纯级别）、1100型高效液相色谱仪、AEU-20电子天平、LG16-W型高速微量离心机以及电热恒温鼓风干燥箱、自制大鼠代谢笼等诸多器具设备。

大鼠：普通级SD系列大鼠（广西医科大学实验动物中心，许可证号为SCXK（桂）2003-0003）。

1.2方法和结果

1.2.1泽泻盐炙：取100kg泽泻并为其置入2kg食盐盐水，搅拌均匀后将其闷润，观察泽泻中盐水被吸尽后将其置于炒制容器中给予文火加热并炒至微黄色，取出成品晾干后使用筛子祛除碎屑。将不同产地的泽泻生品、泽泻盐炙品分别加水煎煮2次，合并生品与盐炙品的提取液并对其进行浓缩处理，置于4℃下冷藏过夜，最终给予离心后取上层清澈液体并置于4℃冰箱内保存。上述操作均依照《中国药典》［3］中相关操作流程标准进行。

1.2.2薄层色谱法：①制备样品：精密称取5g不同产地泽泻生品、盐炙品，加入12倍水，煮沸1h后放冷，将失去的水补足。称取泽泻生品、盐炙品各40mL，在分液漏斗内置入后加入25mL乙酸乙酯，摇振并静置。用水洗2次乙酸乙酯层，水浴挥干乙酸乙酯后易甲醇2mL溶解，可得样品。②采取样品并在100mm× 200mm硅胶G板上点样，展开液为石油醚：乙酸乙酯：乙醇为9：7：1，上行展开并用80℃的5%硫酸乙醇喷后显色，观察。采取样品并在100mm×200mm硅胶G板上点样，展开液为石油醚：乙酸乙酯：乙醇为9：7：2，上行展开后以80℃的5%的香草醛硫酸液显色，观察。

1.2.3高效液相色谱法操作：①色谱条件为：色谱柱Hypersili 0DS25μmC18柱（4.6mm×250mm，5μm）、流动相乙腈-水则为5-95；流动速度为1mL/min，同时波长为540mm、温度20℃。②供试品溶液制备：精密称定各个产地的泽泻生品、盐炙品10g，置于精密称量12倍的水量后持续煮沸1h，放冷后再次称量并加入冷水补足重量，上述液体混合均匀后使用纱布进行过滤、静置处理，取上层清澈液体为水提液。精密称量各个产地的泽泻生品、盐炙品水提液60mL，对其进行水浴浓缩至5mL后得到泽泻提取液。将各个产地的泽泻生品、盐炙品提取液1mL置于高速微量离心机中进行离心旋转10min，旋转速度为10000r/min，而后静置处理并再次以10000r/min的速度离心处理15min后静置成为供试品溶液。最终得到不同产地的泽泻生品、盐炙品溶液10ug在同一色谱条件下进行测定。

1.2.4大鼠测验：取健康大鼠60只，编号后以随机数字表法分组，分为空白对照组（蒸馏水）、阳性对照组（呋塞米）、各产地泽泻生品组、各产地泽泻盐炙组，给予大鼠临床拟人用药剂量的11.2倍剂量作水负荷以及代谢笼实验，持续8h后记录各组大鼠尿量。

1.3统计学方法：本次研究中所有数据使用SPSS18.0进行统计处理，表达方式包括计量资料（）与计数资料（%）两种类型，以t检验和X2检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2　结果

2.1成分分析：薄层色谱法结果显示，以F状斑点为例，各个产地的泽泻生品均出现F状斑点且以四川产地最高，福建产地的泽泻生品在盐炙后F状斑点消失；以C状斑点为例，四川产地的泽泻出现了特有的C状斑点，广西、江西产地的泽泻生品则在盐炙后出现C状斑点；以A、B状斑点为例，广西、四川、福建产地的泽泻生品均出现A、B状斑点，江西产地的泽泻生品则在盐炙后出现A、B状斑点，盐炙品中以广西产地的含量最高；以D状斑点为例，四川、江西、福建产地的泽泻生品、盐炙品均存在D状斑点，四川产地含量最高；以E状斑点为例，四川、江西产地的泽泻生品、盐炙品均存在E状斑点，盐炙后含量有所增加。上述结果说明四川泽泻盐炙后种类、含量无变化；江西泽泻盐炙后种类、成分有所增加；福建泽泻盐炙后种类无变化、含量有所降低；广西泽泻盐炙后种类无变化、含量有所增加。高效液相色谱法检测结果显示上述四个产地的泽泻盐炙前后均无明显变化。

2.2尿量影响：相较于空白对照组，同一时间广西生品给药后1～3h、6h可促使大鼠排尿量明显增加（P＜0.05），而四川生品只是在给药之后的1h促使大鼠排尿量增加，江西生品对大鼠排尿量没有明显的影响（P＞0.05），福建生品给药1～2h后可促使大鼠排尿量明显减少（P＜0.05）。广西泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量增加（P＜0.05），四川泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量明显增加（P＜0.05），而江西与福建泽泻盐炙品可促使大鼠排尿量明显减少（P＜0.05），见表1-表4。

表1　广西泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

表1　广西泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

空白对照组呋塞米阳性组泽泻生品组泽泻盐炙组组别　1h　2h　3h　4h　5h　6h　7h　8h 3.9±1.1 6.9±2.0 5.5±1.3 5.2±2.0 4.8±1.3 9.6±3.3 6.2±1.4 6.7±1.9 5.4±1.1 10.9±3.4 6.8±1.8 7.1±2.6 6.0±1.2 10.9±3.2 7.3±1.6 7.9±3.6 6.1±1.2 10.9±3.4 7.2±1.8 8.4±3.5 6.6±1.5 10.9±3.3 8.6±2.1 8.8±4.3 7.3±1.8 11.3±3.4 8.6±2.3 9.4±4.0 7.6±2.1 11.6±3.6 8.7±2.4 9.6±4.7

表2　四川泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

表2　四川泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

空白对照组呋塞米阳性组泽泻生品组泽泻盐炙组组别　1h　2h　3h　4h　5h　6h　7h　8h 3.9±0.9 8.7±1.8 5.8±1.2 6.2±2.2 4.8±1.3 13.6±3.6 5.8±1.2 6.4±2.1 5.4±1.3 16.5±2.5 6.3±1.3 6.7±2.6 6.1±1.2 17.9±2.6 6.6±1.6 6.8±2.6 6.3±1.5 18.4±3.4 6.6±1.5 7.9±3.2 6.6±1.4 19.1±3.5 7.6±2.6 7.7±3.1 7.2±1.8 19.3±3.2 8.1±2.2 8.4±2.6 7.6±2.2 19.5±3.4 8.9±1.5 9.2±2.8

表3　江西泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

表3　江西泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

空白对照组呋塞米阳性组泽泻生品组泽泻盐炙组组别　1h　2h　3h　4h　5h　6h　7h　8h 3.9±1.1 7.1±1.7 3.2±1.4 1.1±0.8 4.8±1.3 9.3±2.6 3.9±2.0 1.8±1.2 5.4±1.2 11.5±2.4 4.9±2.4 2.6±1.7 6.1±1.4 12.6±2.3 5.7±1.6 3.2±2.0 6.2±1.5 13.4±2.3 5.7±1.6 3.3±1.0 6.6±1.6 14.5±2.5 7.2±1.8 4.8±1.7 7.2±1.8 14.7±2.8 7.5±1.8 5.1±1.9 7.6±2.2 15.5±3.0 8.5±2.0 6.4±2.4

表4　福建泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

表4　福建泽泻生品及盐炙品不同时间对大鼠尿量的影响对比（，mL）

空白对照组呋塞米阳性组泽泻生品组泽泻盐炙组组别　1h　2h　3h　4h　5h　6h　7h　8h 3.9±1.1 6.3±2.4 2.3±1.6 1.6±1.0 4.8±1.1 8.2±4.0 3.0±1.6 4.3±1.5 5.4±1.3 9.4±4.0 4.4±1.8 4.3±1.5 6.1±1.5 10.9±4.1 5.0±1.8 5.3±2.0 6.2±1.5 11.5±4.3 5.6±2.4 5.7±2.3 6.6±1.6 11.9±3.7 5.6±2.4 5.2±2.3 7.1±1.8 12.6±3.8 5.9±3.0 5.9±2.5 7.6±2.0 12.6±3.5 6.9±3.0 7.2±3.4

3　讨论

泽泻的炮制方法包括酒浸后炙、微炒、酒浸后蒸以及盐水搅拌、盐水炒焦等多种方法，当前临床最常使用的泽泻炮制方法是盐炙以及麸炒。事实上，有关泽泻盐炙的方法已经被我国药典进行试验并记录，证实将泽泻盐炙、酒浸后微炒能有效起到补益元气的功效，而将泽泻浸入盐水后微炒则能起到滋阴利水的功效［4］。有关研究证实［5］，在诸多泽泻制品中，泽泻麸炒、泽泻酒炙等均有不同程度的利尿效果，而有关泽泻盐炙的利尿效果仍然缺乏研究。

本次研究中主要针对广西、四川、江西、福建4个产地的泽泻盐炙、生品的利尿效果进行研究，事实上在罗永东等人［6］的研究结果中就已显示，四川、江西等不同产地的泽泻药材在成分、含量上均存在一定的差异（P＜0.05），这与本次研究中部分结论是一致的，而存在差异的原因可能在于本次研究中所用泽泻含量较少以及观察时间较长。同时本次研究发现，不同产地在泽泻生品盐炙后的利尿效果上存在显著差异（P＜0.05），江西、福建两地的泽泻盐炙品甚至出现了抗利尿的现象，说明不同产地的泽泻生品均无长时间的利尿效果，但不同产地的泽泻盐炙品则具有不同的利尿效果。

本次研究中有关泽泻生品、盐炙品的利尿效果研究依然存在观察时间长短的问题。

［1］俞燕，钟瑞建，丁剑虹，等.HPLC法同时测定不同产地车前子生品及盐炙品中3个主要活性成分的含量 ［J］.药物分析杂志，2015，35（5）：889-892.

［2］李寅，陈岩松，马宝东.泽泻炮制及副作用［J］.实用中医内科杂志，2013，27（7）：141-142.

［3］赵宇辉，唐丹丹，陈丹倩.利尿药茯苓、茯苓皮、猪苓和泽泻的化学成分及其利尿作用机制研究进展［J］.中国药理学与毒理学杂志，2014，28（4）：594-599.

［4］曾春晖，杨柯，卢国安，等.广西泽泻盐炙前后利尿作用的实验研究［J］.广西中医药，2011，34（1）：55-56.

［5］曾春晖，杨柯，刘海燕.不同产地泽泻盐炙前后成分差异及利尿作用的研究［J］.中国实验方剂学杂志，2012，18（2）：148-152.

［6］罗永东，邱丽莉，许文，等.不同产地泽泻4个三萜类成分含量比较［J］.中药材，2010，33（12）：1849-1851.

Different regions ze Epsom salt in the water extraction liquid before and after the main ingredients and diuretic effect analysis

Chen Zhongwen（Zhaoqing city hua tuo DuanZhou district hospital pharmacy department）

0bjective：to study the different origin ze Epsom salt in the water extraction liquid ingredients and diuretic effect before and after the main differences.Methods：selected in fujian，jiangxi，sichuan，guangxi four places alisma as research materials，using thin layer chromatography statutory experimental and HPLC quantitative test analysis of the origin of rhizoma alismatis in salt water before and after the main differences of the fluid composition.At the same time，the study of a series of SD rats as the research object，which were randomly divided into 4 way to use a different origin of alisma raw product，main product of metabolic cage method experiment in rats，the determination of variations of urine in rats.Results：compared with blank control group，at the same time in guangxi were 1 to 3h，6 h after the treatment can induce rat urine output increased significantly（P＜0.05），and raw product in sichuan just 1 h after dosing to promote rat urine output increased，Jiang Xisheng product had no obvious effect on rat urine output（P＞0.05），fujian raw product to medicine can induce rats after 1～2h urine output decreased significantly（P＜0.05）.Guangxi ze Epsom salt main product can induce rat urine output increases，the sichuan salt main product can induce rat urine output increased significantly，and jiangxi and fujian salt main product can induce rat urine output decreased significantly（P＜0.05）.Conclusion：the different origin of alisma raw goods no long diuretic effect，but different jersey Epsom salt origin of the goods has diuretic effect of different.

Different regions HPLC Alisma Salt main Water extract Diuretic effect

R285.5

B

1672-8351（2016）09-0126-02