上调miR-181a对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响

余钧辉，孙学军，郑见宝，王孝珑，魏光兵，高　琪，王　恺

(西安交通大学第一附属医院普通外科，陕西西安　710061)



◇基础研究◇

上调miR-181a对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响

余钧辉，孙学军，郑见宝，王孝珑，魏光兵，高琪，王恺

(西安交通大学第一附属医院普通外科，陕西西安710061)

目的探讨miR-181a对胃癌细胞增殖、周期及凋亡的影响及其作用机制。方法荧光实时定量PCR检测5种胃癌细胞及人胃黏膜细胞系GES-1中miR-181a的表达情况，以及胃癌细胞AGS瞬时转染miR-181amimic后miR-181a的表达情况；MTT法和流式细胞仪检测上调miR-181a表达对胃癌细胞AGS增殖、周期和凋亡等生物学行为的影响；Westernblot检测上调miR-181a后细胞周期调控蛋白(CDC25A、cyclinA2、cyclinD1、p21)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达变化。结果与人胃黏膜细胞系GES-1比较，miR-181a在人胃癌细胞株SGC-7901和MKN28表达升高(P均<0.01)，在MGC-803、BGC-823、AGS表达差异无统计学意义(P均>0.05)；瞬时转染miR-181amimic后，胃癌细胞AGS中miR-181a的表达明显上调(P<0.05)；转染miR-181amimics后AGS细胞增殖明显，G0/G1期细胞减少，S期细胞明显增多，细胞凋亡明显减弱(P均<0.05)。Westernblot结果显示，上调miR-181a后胃癌细胞AGS中CDC25A、cyclinA2和Bcl-2表达升高(P均<0.05)，cyclinD1和p21表达差异没有统计学意义(P>0.05)，Bax表达降低(P<0.05)。结论上调miR-181a可以促进胃癌细胞AGS增殖，其作用机制可能与CDC25A、CyclinA2表达升高有关；上调miR-181a可抑制胃癌细胞凋亡，其作用机制可能与Bcl-2表达升高及Bax表达降低有关。

miR-181a；胃癌；增殖；凋亡；细胞周期

胃癌是最为常见的消化道肿瘤之一，全球的胃癌发病率达到第四位，并且在肿瘤相关的死亡中位列第二[1]。microRNA(miRNA,miR)是一类19～25个核苷酸大小的内源非编码小分子RNA，是真核生物中广泛存在的一类重要的调控分子，通过与靶基因信使RNA(mRNA)的3′非编码区(3′-UTR)特异性的碱基配对引起mRNA的降解或翻译抑制，从而发挥对靶基因的转录后沉默作用[2]。生物学分析认为，miRNA调控着人类大约30%的基因，参与调控包括分化、增殖以及凋亡等多个细胞生物学过程[3]。因此，miRNA的表达失调与肿瘤等疾病密切相关。目前的研究显示，所有的实体肿瘤中都存在miRNA表达谱的显著差异，而这些差异表达的miRNA有望成为癌症治疗的新靶点[4]。……