HPLC-MS-MS法测定克拉霉素血药浓度的含量

卞宝军+丁礼琴+金家骅

摘 要 建立一种用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱（HPLC-MS-MS）联用技术测定克拉霉素血药浓度的方法。以甲醇-水（1%甲酸溶液）-乙腈（80∶10∶10）为流动相，罗红霉素甲醇溶液为内标，血浆样品经C18柱分离后，以质谱为检测器，采用选择性离子检测（SIM）测定人体血浆中克拉霉素的含量。

关键词 高效液相色谱-质谱联用 克拉霉素 血药浓度

中图分类号：R927.11； O657.63 文献标识码：A 文章编号：1006-1533（2016）21-0076-04

Determination of clarithromycin in human plasma by HPLC-MS-MS

BIAN Baojun*， DING Liqin， JIN Jiahua**（Shanghai Zhonghua Pharmaceutical Co. Ltd.， Shanghai 200052， China）

ABSTRACT To establish a method for the determination of clarithromycin in human plasma by HPLC-MS-MS. The plasma samples were separated by C18 column and detected by the selective ion monitoring （SIM） with methanol-water （1% formic acid solution） -acetonitrile （80：10：10） as a mobile phase， methanol solution of roxithromycin as an internal standard and the mass spectrometer as a detector.

KEY WORDS HPLC-MS-MS； clarithromycin； plasma concentration

克拉霉素属大环内酯类抗生素，本公司产品为克拉霉素胶囊剂。为增加该品的溶出度，变更了辅料以及制备工艺，故拟进行新制剂的生物等效性评价。由于克拉霉素基本无紫外吸收，故本研究参照文献[1-5]，并作适当修改后，采用高效液相-二级质谱法测定血浆中克拉霉素的浓度。我们对HPLC-MS-MS法测定克拉霉素血药浓度的方法学进行了研究，并测定了18名健康志愿者口服克拉霉素胶囊后的血药浓度，为临床用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

API 3000液相-质谱联用仪（美国ABI公司，包括：Agilent 1100 G1367A自动进样器；Agilent 1100 G1311A泵；Agilent 1100 G1316A柱温箱；API3000质谱仪及Analyst 1.4软件）。XW-80A微型旋涡混合仪（上海沪西分析仪器厂）；TGL-16B台式高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；Millipore A超纯水系统。

克拉霉素标准品（每毫克相当于972单位）和内标罗红霉素标准品（每毫克相当于952单位），均由中国药品生物制品检定所提供；参比制剂为本公司生产的克拉霉素胶囊（每粒胶囊含克拉霉素250 mg），试验制剂1和2为经过变更药用辅料和生产工艺后本公司生产的克拉霉素胶囊（每粒胶囊分别含克拉霉素250 mg和125 mg）；……