RP—HPLC法测定冻干粉针中DHEA的含量

陈晓静　何杰　杨建云等

[摘 要] 目的：建立反相高效液相色谱法测定冻干粉针中DHEA含量。方法：采用Diamonsil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈-水（55：45），流速1.0 mL · min- 1；检测波长206 nm；进样量20 μL ；柱温：室温。结果：在此色谱条件下DHEA与有关物质能达到较好分离，在0.01 mg · mL- 1～

0.7 mg · mL- 1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系， r=0.9998；方法重复性RSD为0.42%；加样平均回收率（n=6）为98.91%。结论：该方法准确可靠，灵敏度高，专属性好，可用于测定DHEA冻干粉针含量。

[关键词] 高效液相色谱；冻干粉针；DHEA；类固醇激素

中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：2095-5200（2015）05-071-03

[Abstract] Objective： To establish an RP-HPLC method for determination of the content of DHEA. Methods：Diamonsil C18 （250 mm× 4.6 mm，5 μm） column was adopted ； the mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile - water （55：45） at the flow rate was 1.0 mL·min- 1 ；The ultraviolet detection wavelength was set at 206 nm； Loaded volume was 20 μL； the column temperature was room temperature. Results： DHEA and its related substances could be separated well. The linearity of DHEA was well correlated （ r=0.9998） within the range of 0.01 mg · mL- 1～0.7 mg · mL- 1. The method precision RSD was 0.42%. The average recoveries （n=6） was 98.91%. Conclusion： The method appeared to be accurate， reliable， sensitive， specific and can be used for the determination of the content of freeze-dried powder injection DHEA .

[Key words] HPLC；freeze-dried powder injection；DHEA； steroid hormone

引言

DHEA（脱氢表雄酮，dehydroepiandrosterone）为肾上腺及性腺分泌的一种类固醇激素，经大量研究发现，DHEA具抗衰老、预防心血管疾患、改善记忆、增强免疫力作用[1～2]，对小鼠的肝癌[3]、肺癌[4]、淋巴瘤[5] 等均有明显抑制作用；还能促进人类淋巴组织IL-2产生和释放，这正是HIV感染机体关键免疫步骤；此外，对糖尿病患者高血糖所致肾小球细胞损伤也有一定逆转作用[6]。人体试验表明，DHEA生理剂量未见明显毒副作用，但也有人对其大剂量服用带来潜在危害担忧，有试验表明[7-8]，过氧化酶体增生剂有致癌性，DHEA大剂量服用可引起肝细胞过氧化酶体增生，而低剂量无明显致过氧化酶体增生作用。因此，控制DHEA摄入量能合理有效降低其毒副作用。将DHEA做成冻干粉针注射剂，可降低给药剂量，提高生物利用度，而MATHII- AS LEBLANC等[9]研究DHEA在食蟹猴中药代动力学数据正好可以证实这一点。目前DHEA口服给药居多，DHEA冻干粉针剂是一种注射给药新剂型，本文建立简便、准确、可行、高效HPLC分析方法，用于测定冻干粉针中DHEA含量，为其质量可控奠定基础。……