东亚钳蝎毒素对人结肠癌细胞Caco—2的增殖抑制作用研究

贺源+肖凯夫+王智

摘 要：为研究东亚钳蝎毒素对人结肠癌细胞Caco-2增殖的影响，以不同浓度的东亚钳蝎毒素（10、20、40 μg/mL）干预体外培养的Caco-2细胞，分别于24、48 h后，用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法，观察毒素对Caco-2细胞的增殖抑制作用，运用淋巴细胞转化试验和乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测蝎毒素对Caco-2细胞的作用途径。结果表明：东亚钳蝎毒素不仅能抑制Caco-2细胞的增殖而且能促进淋巴细胞转化，且毒素对Caco-2细胞增殖的抑制作用具有浓度和时间的依赖关系，随浓度加大和时间延长，对Caco-2细胞增殖的抑制作用增强。

关键词：Caco-2人结肠癌细胞；东亚钳蝎毒；细胞增殖；抗肿瘤

中图分类号：Q78文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）12-0136-06

Abstract The effects of Buthus martensii Karsch venom on proliferation of human colon adenocarcinoma cell line Caco-2 were investigated in this study. The test used different concentrations （10， 20， 40 μg/mL） of Buthus martensii Karsch venom to interfere the Caco-2 cells cultured in vitro for 24 and 48 hours， then the proliferation inhibition effects was observed by means of MTT assay. The mechanism of venom on Caco-2 cells was measured by lymphocyte transformation and lactate dehydrogenase release assays. The data indicated that Buthus martensii Karsch venom could inhibit the Caco-2 cell proliferation and promote the lymphocyte transformation. Besides， the inhibition effects were closely related to the treatment time and venom concentration， which enhanced with the extension of treatment time and increase of venom concentration.

Keywords Human colon adenocarcinoma cell line Caco-2； Buthus martensii Karsch； Cell proliferation； Antitumor

癌症已经成为威胁人类健康的第一杀手[1]，也是死亡率最高的疾病之一[2，3]，癌症的预防与治疗任务十分艰巨[4]。根据目前癌症的发病趋势，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50%[5]。因此，找到并运用新的抗癌药物成为人类战胜癌症的关键。

现有研究表明，蝎毒对肿瘤细胞有直接杀伤作用，能有效地导致癌细胞凋亡[6]。蝎毒在抗肿瘤的同时还具有明显的调节和增强机体免疫力的作用，是一种理想的抗肿瘤药物[7-10]。目前，关于蝎毒抗肿瘤研究的报道很多，对蝎毒素的分离、纯化及药理作用等也进行了深入研究[11-16]。本研究就是在前人工作的基础上，以常见的东亚钳蝎（Buthus martensii Karsch）毒素作为研究材料，用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法，观察不同浓度东亚钳蝎毒素处理不同时间对Caco-2细胞的增殖抑制作用，同时通……