长链非编码RNA CCAT1对人宫颈癌XB1702细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

2017-02-16 08:21:28高金苹张绍菊罗志红李津
中国医药生物技术 2017年1期

高金苹,张绍菊,罗志红,李津

长链非编码RNA CCAT1对人宫颈癌XB1702细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

高金苹,张绍菊,罗志红,李津

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子 1(CCAT1)对宫颈癌 XB1702 细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。

方法通过电穿孔法分别将 CCAT1 siRNA 和重组表达载体 pcDNA3.1-CCAT1 转染人宫颈癌 XB1702 细胞后,G418 筛选得到稳定转染细胞系,实验分为 3 组:CCAT1 siRNA 转染组、pcDNA3.1-CCAT1 转染组和空白对照组。转染 48 h 后,RT-PCR 检测细胞中 CCAT1 lncRNA 表达水平;CCK8 检测细胞增殖,TUNEL 法检测细胞凋亡影响;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调 RNA CCAT1 表达联合 X射线照射对宫颈癌的生长抑制作用。

结果干扰 XB1702 细胞中 CCAT1 lncRNA 表达后,XB1702 细胞增殖被抑制,细胞凋亡率增加;裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(正常 XB1702 细胞种植组)差异有统计学意义(P < 0.05);上调 XB1702 细胞中 CCAT1 lncRNA 表达后,XB1702 细胞增殖能力明显增强,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P < 0.05),而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。

结论下调 CCAT1 mRNA 表达能抑制人宫颈癌 XB1702细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性。

宫颈肿瘤; 肿瘤移植; 小鼠,裸; XB1702细胞; 长链非编码 RNA

宫颈癌是一种严重威胁女性生殖健康的疾病,全世界每年有近 13 万女性被确诊为宫颈癌患者[1-3]。临床上宫颈癌患者由于术后存在高危因素或局部肿瘤过大常需要进行放疗,增强宫颈癌细胞的放射敏感性尤为重要[4-6]。长链非编码 RNA(lncRNA)是近年来研究的一大热点。研究表明,结肠癌相关转录因子 1(CCAT1)在结肠癌组织中表达异常[7-9]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 6 周龄健康 BALB/c 裸鼠36只,体重 100 ~ 120 g,均为雄性,由河北医科大学动物实验中心提供。室温 25 ℃,湿度 50% ~80%,SPF 环境下自由饮水和采食。

1.1.2 仪器和试剂 DMEM 完全培养基中包含2 mmol/L L-谷氨酞胺、10% FBS、1 mmol/L 丙酮酸钠、100 mg/ml 青霉素链霉素二抗;……

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