关于酶联免疫法与胶体金法应用在乙肝表面抗原检测中的效果

张昆英

【中图分类号】R18.56 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2017）01-0-02

乙肝表面抗原主要是指乙肝病毒外壳蛋白，是临床上乙肝血清标志检查中的一项主要指标之一，其自身不存在传染性，通常与乙肝病毒共同存在[1]。乙肝病毒的传播，主要是通过血液传播感染这一途径，所以，为了有效控制血液传播风险，需要对血样质量进行检验，以确定血样中是否存在乙肝表面抗原[2]。当前，临床上对乙肝表面抗原检测通常采用酶联免疫法与胶体金法。本文主要研究酶联免疫法与胶体金法应用在乙肝表面抗原检测中的效果，并总结如下：

1.资料与方法

1.1 血样来源

此次研究的血样标本，均为我院2015年12月-2016年8月期间采集的2040份体检样本。所有样本均使用真空管采集，且均对每以标本予以乙肝病毒携带普查，并在当日完成所有样本检测。

1.2 仪器与试剂

此次研究所使用的检测仪器均有上海科华生物有限公司提供的KHB ST36w 洗板机与KHB ST-360 酶标仪，两种述仪器皆在通过厂方严格校准与调试之后方投入使用。同时，此次所使用的酶联免疫法检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司生产，生产批号为20121106 20130124 20130307；胶体金法檢测试剂由艾康生物技术有限公司生产，生产批号为20120719 20130201 20130407 20130711，且试剂均在有效试用范围。

1.3 方法

分别使用酶联免疫法与胶体金法对2040份血样予以乙肝表面抗原检测，对两种检测的结果、方法、特征进行回顾性分析。

（1）酶联免疫法。首先吸取20μL稀释液滴入微孔并加入100μL的血清，使其在37℃下温育60min，之后再将酶结合物50μL加入到反应孔中，再温育30min，在温育结束后治愈洗板机进行洗涤拍干，并加底物显色，最后进行终止液的加入并用酶标仪予以比色，正确读取吸光度值并加以计算。

（2）胶体金法。首先使用加样器吸取新鲜血清60μL慢慢滴至试纸条加样端，让血清自动通过滤膜并向检测端移动。之后在室温环境下放置10min，对检验结果进行观察。

（3）结果判读。酶联免疫法结果判读：若S/CO≥1时，表明检测结果呈阳性；若S/CO<1，则表明检测结果呈阴性。胶体金法结果判读：若试纸条检测线与对照线位置出现两条紫红色免疫复合物线条，表明结果呈阳性；若紫红色免疫复合物线条只出现于试纸条对照线位置，则表明结果呈阴性。

1.4 统计学处理

采用SPSS20.0软件处理本次数据，计量资料表示用“x±s”，计数资料用χ? 检验，差异存在统计学意义时P<0.05。

2.结果

采用酶联免疫法检测时，检测出阳性血样标本有186份，占总数的9.11%；而采用胶体金法检测时，检测出阳性血样标本179份，占总数的8.77%。采用两种方法对全部血样标本进行检测时，结果同时显示为阳性的血样标本为170份，酶联免疫检测显示阴性，而胶体金法检测显示阳性有4份；酶联免疫法检测显示为阳性而胶体金法检测显示为阴性有10份。运用两种方式对2040份血样检测，结果显示同为阴性血样有1860份（具体如表1所示）。

3.讨论

胶体金法及酶联免疫法为临床上检测乙肝表面抗原的常见方法，两者在检测原理上有着较大的区别。相对来讲，胶体金主要是由氯金酸与还原剂等物质发生反应而聚合成的颗粒，该种种颗粒会受到静电影响，而成为胶体状态，并具有较强的稳定性。而在弱碱状况下，胶体金会带有负电荷，并与蛋白质分子正电荷基团相结合[3]。所以，搞这个结合属于静电结合，蛋白质的生物特性通常不会受到影响。另外，胶体金具有敏感性、方便性、稳定性、快捷性、试剂与设备无特殊性、结果直观性等特征。

而酶联免疫法则是一种相对特殊的试剂检测形式，主要是以免疫酶技术为基础所形成的新型免疫测定技术。主要通过酶复合物与抗体的结合，之后利用试剂显示的颜色予以检测[4]。该种方法在敏感性与特异性上较高，但同时，也存在操作繁杂的缺陷。在检测过程中，致使结果受到影响的各种因素也比较多，对检测设备与检测人员有着较高的要求。

从此次研究结果也可以看出，在2040份血样标本中，使用酶联免疫法检验结果呈阳性的血样标本为186份，占总数的9.11%；而采用胶体金法检验结果呈阳性的血样标本为179份，占总数的8.77%。也就是说，在乙肝表面抗原检测中采用酶联免疫法的灵敏度明显要高于胶体金法，比较差异存在统计学方面的意义（P<0.05）。

综上所述，在大规模乙肝病毒携带筛检中，可采用胶体金检测法对血样进行快速的筛查，以提高检测效率，缩短初筛时间。人在少数胶体金法检测结果呈阳性的二次筛检中，可采用酶联免疫检测以确保结果的精准性。

参考文献

[1]侯娟，陈伟金.乙型肝炎表面抗原不同检测方法的优势比较分析[J].当代医学，2014，20（12）：23-24.

[2]刘加红.两种乙肝表面抗原检测法的比较[J].当代医药论丛，2014，12（11）：79.

[3]李玉亮.浅谈应用胶体金法与酶联免疫法检测乙肝表面抗原的优缺点[J].当代医药论丛，2014，12（16）：45-46.

[4]安红霞.ELISA法与金标法相结合提高乙肝表面抗原检测准确度的探讨与应用[J].中国伤残医学，2013，21（06）：295-296.